描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株；(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮細胞株，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
產品名稱 | CHL倉鼠肺細胞操作 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963236 |
收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1001288-58-9 FT011 5mg Fructus canarii青果探針法PCR鑒定試劑盒
1001288-58-9 FT011 10mg Fructus canarii青果探針法PCR鑒定試劑盒
1001288-58-9 FT011 50mg Cortex fraxini秦皮探針法PCR鑒定試劑盒
1001288-58-9 FT011 100mg Cortex fraxini秦皮探針法PCR鑒定試劑盒
100130-32-3 VUF 8430 dihydrobromide 10mg Radix gentianae macrophyllae秦艽探針法PCR鑒定試劑盒
1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin 65855-02-9 中文名：1-芐基-5-乙氧基海因 分子式：C12H14N2O3 度：98.0% 小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISAKit ELISA. 96T/48T
1-Benzyl-1H-indazol-3-ol 2215-63-6 中文名：1-芐基-1H-吲唑-3-醇 分子式：C14H12N2O 度：98.0% 小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISAKit ELISA. 96T/48T
1-Benzyl L-aspartate 7362-93-8 中文名：L-天冬氨酸1-芐酯 分子式：C11H13NO4 度：98.0% 小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Benzyl D-aspartate 79337-40-9 中文名：D-天冬氨酸1-芐酯 分子式：C11H13NO4 度：98.0% 小鼠骨堿性0酸酶（BALP）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Amino-4-hydroxyanthraquinone 116-85-8 中文名：1-氨基-4-羥基蒽醌 分子式：C14H9NO3 度：98.0% 小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CHL倉鼠肺細胞操作102396-24-7 Jasplakinolide 100ug Radix aconiti kusnezoffii草烏染料法PCR鑒定試劑盒
102396-24-7 Jasplakinolide 50ug Radix aconiti kusnezoffii草烏染料法PCR鑒定試劑盒
102410-65-1 Fmoc-Phg-OH 25g Fructus tsaoko草果染料法PCR鑒定試劑盒
102410-65-1 Fmoc-Phg-OH 5g Fructus tsaoko草果染料法PCR鑒定試劑盒
102418-74-6 (+)-Biotin 4-Amidobenzoic Acid (sodium salt) 10mg Semen alpiniae katsumadai草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
