一、原理及適用范圍
阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中，在一定條件下可引起人和動物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結腸炎和菌血癥等疾病，且伴隨有嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥、發(fā)育障礙等癥狀，引起的死亡率高達50％以上。臨床調查證明，新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關，奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導致感染的發(fā)生。
阪崎腸桿菌快速檢驗套裝由阪崎腸桿菌快速增菌劑和阪崎腸桿菌測試片兩個產品組成。阪崎腸桿菌快速增菌劑是根據(jù)污染阪崎腸桿菌樣品——乳品及乳制品而專門設計的快速增菌劑，6 h～8 h即可完成樣品中阪崎腸桿菌的快速定向增殖，有效的縮短了檢測時間，提高了阪崎腸桿菌的檢測準確度。
阪崎腸桿菌測試片（FilmplateTM Enterobacter sakazakii BQ208）是一種預先制備好的一次性培養(yǎng)基產品，由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成，簡化了檢測程序，更加適合各級檢驗部門和食品生產企業(yè)使用。本產品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測。
參照標準：食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 阪崎腸桿菌檢驗（GB 4789.40-2010）。
二、操作方法
1、樣品處理：
1.1、固態(tài)奶粉樣品處理：取一包增菌劑粉，倒入1000mL的三角瓶中，加入900mL純凈水，攪拌均勻，蓋塞后加熱煮沸，保持20min（有條件可采用115℃滅菌15min）。使用前預熱至44℃左右，加入100g奶粉樣品，*溶解后，44℃±0.5℃培養(yǎng)6h即可。
1.2、液態(tài)奶樣品處理：取一包增菌劑粉，溶于900mL純凈水中，攪拌均勻，每100mL分裝于250mL三角瓶中，蓋塞后，加熱煮沸，保持20min（有條件可采用115℃滅菌15min）。使用前預熱至44℃左右，加入100mL液態(tài)奶樣品，混合均勻后，44℃±0.5℃培養(yǎng)6h即可。
2、接種：取出經(jīng)過增菌的樣品液，混勻后吸取1mL加入到4mL無菌水中，制成五倍稀釋液。將阪崎腸桿菌測試片（BQ208）置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取五倍稀釋液1mL慢慢均勻地滴加到測試片*濾紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s使培養(yǎng)基凝固，每個樣品接種兩片。做一片空白陰性對照。
3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15h～24h。
三、結果判讀
對測試片進行觀察，呈藍綠色的菌落為阪崎腸桿菌，為陽性結果；無任何點為陰性結果。出現(xiàn)陽性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
四、結果報告
在100mL（或100g ）樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。
五、附加說明
1、使用阪崎腸桿菌快速增菌劑結合阪崎腸桿菌測試片的方法來檢驗阪崎腸桿菌，僅需要21h～30h即可完成，這種方法快捷、方便，檢驗準確性與國標方法（GB 4789.40-2010）相比，無顯著性差異。
2、快速增菌劑僅適于乳品及乳制品的增菌作用，配成增菌液加入樣品前請務必預熱至44℃左右使用。
3、操作方法2.2中將樣品增菌液*稀釋5倍后進行檢測，具體可根據(jù)樣品污染程度酌情考慮。
4、如采用煮沸滅菌法，請當天使用，采用高壓滅菌方法請在一周內使用。
5、注意使用過的增菌液中和測試片上可能帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
