一、原理及適用范圍
大腸桿菌STEC,是腸出血性大腸桿菌的一種,能產(chǎn)生志賀毒素的非O157:H7大腸桿菌,包括了在日本出現(xiàn)的E.coli O111以及2011年在德國及歐洲其他國家出現(xiàn)的E.coli O104。這類大腸桿菌感染后,可引起自限性腹瀉、出血性結(jié)腸炎和溶血性尿毒綜合癥(HUS)。一般寄生在牛、羊等家畜和其他反芻動物體內(nèi),人類主要是通過未經(jīng)烹調(diào)或烹調(diào)不*的肉類和奶制品等被感染。
另外有60種STEC血清型在世界各地的腹瀉疾病中被發(fā)現(xiàn),一些非O157的血清型已證明與在美國歐洲及亞洲發(fā)生的食源性疾病有關(guān)。因此,世界各地的監(jiān)管部門呼吁食品行業(yè),對這些微生物加以重視并采取監(jiān)管措施。大腸桿菌STEC測試片采用進口高選擇性培養(yǎng)基作為主要原料,加入特異性酶顯色劑,運用微生物測試片專有技術(shù),做成一次性快速檢驗產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15-~24h就可確認(rèn),大大地簡化了檢測程序,非常適合各級檢驗部門和食品企業(yè)使用。
二、操作方法
1、樣品處理:取樣品 25 mL(g)放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2、接種:將大腸桿菌STEC測試片(BS211)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置5 min使培養(yǎng)基凝固,后用手輕輕地壓一下,每個樣品接種兩片。
3、培養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為37℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
三、結(jié)果判讀
對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌STEC;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽性菌落的樣本,用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗一次。
四、附加說明
注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。