蘇云金桿菌的部分生化試驗(yàn)鑒定方法！
蘇云金桿菌的部分生化試驗(yàn)鑒定方法！
一、目的要求：
應(yīng)用生物化學(xué)技術(shù)對(duì)昆蟲(chóng)病原細(xì)菌進(jìn)行鑒定，乃是一種十分簡(jiǎn)便快速的方法，鑒定蘇云金桿菌的生化指標(biāo)是：V、P反應(yīng)，*酶，蛋白水解，吐溫酶，水楊素，七葉靈、蔗糖、甘露糖、表膜、酶、淀粉、幾丁質(zhì)酶、*脫羥酶等。本實(shí)驗(yàn)是通過(guò)簡(jiǎn)單的生化測(cè)定來(lái)了解蘇云金桿菌的生化鑒定技術(shù)。
二、實(shí)驗(yàn)材料：
天平、電爐、藥勺、量筒、燒杯、pH試紙7、高壓鍋（手提式）、接種環(huán)
三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
⒈各種糖利用：
蛋白胨 1%，瓊脂 2%，蔗糖（甘露糖）1%，水楊素 0.5%，1%酸性復(fù)紅水溶液 0.5%。
蛋白胨加熱溶于水中，加入酸性復(fù)紅水溶液。分別加入一種糖加熱溶解，以不加糖的蛋白胨作對(duì)照。分裝試管，調(diào)pH至7.58，滅菌30分鐘。接種后于30恒溫培養(yǎng)檢查產(chǎn)酸情況，若培養(yǎng)基變紅者為正反應(yīng)。
⒉七葉靈利用：
1%，七葉靈 0.5%，瓊脂 2%，另配5%三氯化鐵水溶液?jiǎn)为?dú)滅菌。
培養(yǎng)基溶后，先將三氯化鐵每皿滴入2滴，后倒平板混勻。凝固后電接菌種，30 培養(yǎng)3-5天。菌苔周圍出現(xiàn)深褐色區(qū)為陽(yáng)性反應(yīng)。
⒊淀粉水解試驗(yàn)：
5克，NaCl 5克，可熔性淀粉 5克，瓊脂 10克，蒸餾水 1000毫升。
將試驗(yàn)菌點(diǎn)種于平板上，徒長(zhǎng)出菌落后，收Lugoc氏碘液傾注于平板表面，菌落四周有透明圈者為陽(yáng)性放應(yīng)。
⒋V、P反應(yīng)：
蛋白胨5克，葡萄糖5克，NaCl 5克，蒸餾水 1000毫升；分裝試管 30分鐘滅菌。
接菌后于37 培養(yǎng)24小時(shí)，每管加入4%KOH溶液10-20滴，再加等量的5%的一萘酚乙醇水溶液后，用力振蕩。然后置37 下保溫0.5小時(shí)。培養(yǎng)物出現(xiàn)紅色即為V、P正反應(yīng)，并設(shè)未接種的試管為對(duì)照。
⒌*酶試驗(yàn)：
蛋白胨1%，酵母膏 0.3%，NaCl 0.5%，瓊脂 2%，卵黃2-3%， pH 7-7.2。
用75%酒精將新鮮雞蛋進(jìn)行表面消毒，并用經(jīng)火焰滅菌的鑷子將蛋兩端各打一個(gè)孔，傾去蛋清，然后用無(wú)菌5ml吸管取出卵黃，加至觸化后冷卻至50。C左右的培養(yǎng)基中，使卵黃含量為培養(yǎng)基總體積的2~3%?；靹蚝蟮蛊桨?，點(diǎn)接菌種24小時(shí)后觀察，菌液邊緣出現(xiàn)混濁圈者表示卵鱗酯酶為陽(yáng)性。
⒍菌膜形成試驗(yàn)：
肉湯試管接種，30靜止培養(yǎng)24小時(shí)后觀察菌膜形成情況及搖動(dòng)后膜破粹情況。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有Biolog微生物鑒定系統(tǒng)，超低溫冰箱，生物安全柜等儀器設(shè)備可進(jìn)行對(duì)微生物分離、鑒定等常規(guī)的分子實(shí)驗(yàn)研究。對(duì)我國(guó)生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求進(jìn)行積極的面對(duì)社會(huì)乃至國(guó)外收集保藏提供微生物菌種資源。在保證生物安全和保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的前提下，為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供微生物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。
除此之外，我們還擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對(duì)購(gòu)買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇耍本┌贇W博偉生物技術(shù)有限公司與國(guó)內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、*和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
