銀耳菌種母種的制作方法！
銀耳菌種母種的制作方法！
銀耳菌種必須同時有銀耳菌絲和香灰菌絲才能出耳，怎樣制作銀耳菌種的母種？下面來簡單介紹一下。在制作母種的過程中，可以選用耳木分離法和孢子分離法。
一、耳木分離法
耳木分離出來的菌種，已有銀耳菌絲和香灰菌絲。其分離步驟如下。步，當1~2批銀耳生長時，選擇銀耳生長旺、朵大、色白、肉厚、開片正常、產(chǎn)量高、無病蟲害的耳木，從長有子實體的部位鋸下1~2厘米厚的一段，去掉耳基及樹皮，用75%的酒精涂擦其表面，然后放入消毒的接種箱內(nèi)。
第二步，把木塊浸入0.1%液中20~30秒鐘，用無菌水沖洗殘留的藥液，再用無菌紗布揩干。第三步，用消毒的小榔頭和*先劈取耳基附近的木片（選有大理石花紋處），再把木片劈成如火柴桿粗的小木條（或用利刀削下粉末狀的木屑）。第四步，用消毒的鑷子把一個木條（或小木屑）接入斜面培養(yǎng)基中。
第五步，把試管置23~25℃培養(yǎng)，當木條上（或木屑上）長出纖細的白色菌絲，并延伸至培養(yǎng)基上。這時培養(yǎng)基的顏色變黃轉(zhuǎn)黑，表面出現(xiàn)淺灰色斑紋，這就是香灰菌絲。7天后，木條上出現(xiàn)短絨狀菌絲，同時分泌白色或淡黃色水珠，這就是銀耳菌絲。生長過程中發(fā)現(xiàn)紅、綠、黃、黑等孢子和螨類害蟲要及時淘汰，但淺黃色的凸起糊狀小菌落是芽孢，不是雜菌。第六步，挑取少許銀耳菌絲和香灰菌絲，接種于新的斜面培養(yǎng)基上，進行擴大，1周后菌絲長滿試管，即成母種。
二、孢子分離法
孢子分離的菌種萌發(fā)成芽孢子（銀耳孢子在一般馬鈴薯洋菜培養(yǎng)基上易形成芽孢子）或銀耳菌絲，可用于栽培種復壯或同香灰菌絲混合制成母種。其步驟如下。步，取數(shù)只50毫升三角瓶，每只裝0.5厘米厚的培養(yǎng)基，滅菌備用。第二步，選擇朵大、肉厚、色白、開片正常、大小適中、無雜菌和病蟲害、八九成熟的鮮耳作為種耳，移入消毒的接種箱中，用無菌水反復沖洗幾次。
第三步，用消毒紗布或吸水紙，把耳片表面揩干。第四步，用消毒的*割取一小片耳瓣，掛于消毒的金屬鉤子上，迅速移入三角瓶中，鉤子另一端鉤在三角瓶口上，使耳瓣距離培養(yǎng)基表面2~3厘米，塞上棉塞。第五步，把三角瓶置23~25℃下培養(yǎng)48小時，培養(yǎng)基表面可見霧狀的孢子及乳白色、糊狀、邊緣光滑凸起的小菌落。這時，在消毒的接種箱內(nèi)取出鉤子和耳瓣，塞好棉塞，繼續(xù)在23~25℃下培養(yǎng)，2~3天后，培養(yǎng)基表面就出現(xiàn)乳白色、半透明狀，略有光澤，表面粘稠，邊緣光滑，*隆起的芽孢菌落。
芽孢在一般培養(yǎng)基上不易萌發(fā)，但在以下幾種培養(yǎng)基上可以萌發(fā)：玉米粉60%，木屑34%，骨粉1%，過磷酸鈣1%，硫酸銨0.1%；細米粉98%，骨粉1%，硫酸銨0.1%；米粉50克，花生米（細碎）40克，蔗糖20克，瓊脂20克，水1000毫升；馬鈴薯200克（去皮），瓊脂23克，蔗糖20克，過磷酸鈣2克，水1000毫升，pH5.6~6.2；細米粉500克，麥麩500克，骨粉10克，過磷酸鈣10克，硫酸銨1克，充分混勻，用水調(diào)成膏狀，搓條裝入試管，用竹片壓成斜面；同香灰菌絲配合，或在香灰菌絲浸出液制成的培養(yǎng)基上。
香灰菌絲分離法制作母種。其分離培養(yǎng)同前述耳木分離法，即用接種刀小心地去掉耳木表層老菌絲，取出深處有黑色花紋部分，搗成米粒大小，接種于斜面培養(yǎng)基上。香灰菌絲爬壁力強，挑取先端白色部分移管純化，經(jīng)3~5次純化，可得到純香灰菌絲。也可以取一瓶已長到底的銀耳木屑菌種，把瓶打破，取出菌柱，用接種針刮上面的灰綠色或黑色處，取得少量孢子，接種于斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)純化。這兩種分離方法，前一種生活力強。
也可以用混合培養(yǎng)制母種。把孢子分離法培養(yǎng)出來的銀耳菌絲，和香灰菌絲分離法純化得到的香灰菌絲混合培養(yǎng)，即成母種。值得注意的是，不同地區(qū)，不同耳木分離的銀耳菌絲和香灰菌絲不能隨便調(diào)換，隨便組合，否則就有可能失敗。母種培養(yǎng)方法是先將銀耳菌絲接種于斜面培養(yǎng)基，置于25℃培養(yǎng)，待銀耳菌絲直徑長至1厘米，再接香灰菌絲，待菌絲蔓延至全試管，即為母種。必須指出，銀耳菌絲少，香灰菌絲多，將來就不會出耳，或者出耳率很低。
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