實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，Z后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR的反應(yīng)條件：
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小，設(shè)定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外，Extension時間太短時，會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。
苯磺酰肼 98% 芥酸豌豆提取物Human IL1R1(Interleukin 1 Receptor Type I) ELISA Kit

Human IL1R2(Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit

2,2,6-三基-4H-1,3-二噁英-4-酮 90% 5-氨基苯并咪唑酮石竹提取物Human IL1RL1(Interleukin-1 receptor-like 1) ELISA Kit

Human IL-2(Interleukin 2) ELISA Kit

鉻粉 99.5%,300目 十一酸蓮子草提取物Human IL-20(Interleukin 20) ELISA Kit

Human IL-22(Interleukin-22) ELISA Kit

焦磷酰氯 97% 基三氯化錫顯齒蛇葡萄葉提取物Human IL-24(Interleukin 24) ELISA Kit

Human IL-27(Interleukin-27 subunit alpha) ELISA Kit

L-腎上腺素 98%（劇品） 2,5-己二酮蜂斗菜提取物Human IL-28A(Interleukin-28A) ELISA Kit

Human IL-29(Interleukin 29) ELISA Kit

4-羥基-6-基-2-吡喃酮 99% 苯己烷天竺葵浸膏Human IL-3(Interleukin 3) ELISA Kit

Human IL-31(Interleukin-31) ELISA Kit

煙酸 99% 二醇柚子皮提取物Human IL-33(Interleukin-33) ELISA Kit

Human IL-4(Interleukin 4) ELISA Kit

煙酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品 氟胺氰菊酯黑加侖提取物Human IL-5(Interleukin 5) ELISA Kit

Human IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit

重去腎上腺素 ≥98%(HPLC),USP 氯苯胺靈小檗提取物Human IL-6R alpha(Interleukin-6 receptor subunit alpha) ELISA Kit

Human IL-7(Interleukin 7) ELISA Kit

煙酸 用于植物細(xì)胞培養(yǎng)，≥99% 4-羥基-4'-異氧基二苯砜花楸果提取物Human 15-LO(Arachidonate 15-Lipoxygenase) ELISA Kit

Human IL-8(Interleukin 8) ELISA Kit
白扁豆PCR鑒定試劑盒價格AIRA(Human anti-insulin receptor antibody) ELISA Kit  人抗胰島素受體抗體五味子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% 香酚 natural, ≥98%, FCCFowl Adenovirus(FAdV-A)

AIF(Mouse apoptosis inducing factor) ELISA Kit  小鼠凋亡誘導(dǎo)因子斯皮諾素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%偏硼酸鈣 39-44% B2O3 basis, 31-37% CaO basis, powderFowl Adenovirus(FAdV-B)

AIF(Human apoptosis inducing factor) ELISA Kit  人凋亡誘導(dǎo)因子五味子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98%八-O-?；?D-(+)-蔗糖 98%Fowl Adenovirus(FAdV-C)

AIF ELISA Kit  大鼠凋亡誘導(dǎo)因子五味子醇 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% β-D-葡萄糖五酸酯 98%Fowl Adenovirus(FAdV-D)

AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit  人芳香烴受體五味子酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% 曲酸 99%Fowl Adenovirus(FAdV-E)

AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit  人抗人絨毛膜促性腺激素抗體五味子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%α-D(+)-五酰葡萄糖 98%Fowl Pox Virus(FPV)

AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit  人抗染色體抗體延胡索素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>97%酰溴-α-D-葡萄糖 包含 1% CaCO3 穩(wěn)定劑, 98%Fowlpox Virus(FPV)

AHA(Human anti-Histone antibody) ELISA Kit  人抗組蛋白抗體延胡索素 97%4,4'-四基二氨基二苯烷 98%Francisella novicida

Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型2,3,5,4-四羥基二苯烯葡萄糖苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98%蒿本內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥90%Francisella spp.

aGT(Mouse angiotensinogen)ELISA Kit  小鼠血管緊張素原土貝母苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>95%呋喃唑酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品Francisella tularensis