儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 巴戟天染料法PCR鑒定試劑盒說明書 |
英文名稱 | Radix morindae officinalis |
貨號 | YSP8578 |
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，Z后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
1-氯-6-苯基己烷 98+% 4-氧基間苯二酸樹莓果汁粉Human COTL1(Coactosin-like protein) ELISA Kit
Human CD83(CD83 antigen) ELISA Kit
2-苯基環(huán)戊酮 97% N-基四-2H-吡喃-4-胺桔子果粉Human DLG4(Disks large homolog 4) ELISA Kit
Human CH25H(Cholesterol 25-hydroxylase) ELISA Kit
1-(4-氯基)鹽酸鹽 95% 2-溴-3',5'-二氟苯酮CBZ-D-氨酸Human DAB1(Disabled homolog 1) ELISA Kit
Human ABCA1(ATP-binding cassette sub-family A member 1) ELISA Kit
3-氯-4-氟芐胺 97% 4-(2-羥基氧基)苯醛D-氨酸酯鹽酸鹽Human CYP3A5(Cytochrome P450 3A5) ELISA Kit
Human FOXC2(Forkhead box protein C2) ELISA Kit
4-氯-2-氟-1-苯 AR 3-(4-氧基苯基)-3-氧代酸酯達卡他韋Human DMGDH(Dimethylglycine dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit
Human CD42(Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit
2-氯-6-腈 98% 3,4,5-三氟苯腈可可粉Human AIF1(Allograft inflammatory factor 1) ELISA Kit
Human CUBN(Cubilin) ELISA Kit
無水氯化鉻(Ⅱ) 97% 3,4,5-三氟苯酮黃瓜粉Human BSN(Protein bassoon) ELISA Kit
Human SLC14A1(Urea transporter 1) ELISA Kit
無水氯化鉻(Ⅱ) 99.9%，80目粉末 3,5-二氟芐氯紫甘藍粉Human PGK1(PhosphoglyceRate kinase 1) ELISA Kit
Human Aadat(Kynurenine/alpha-aminoadipate aminotransferase, mitochondrial) ELISA Kit
4-環(huán)己苯胺 97% 3-溴-4-氧基苯枸杞果粉Human AOPEP(Aminopeptidase O) ELISA Kit
Human DEFA3(Neutrophil defensin 3) ELISA Kit
1-(2-苯腈) 99% 吡咯-2-羧酸酯黑加侖果粉Human MMP26(Matrix metalloproteinase-26) ELISA Kit
Human DNASE1L3(Deoxyribonuclease gamma) ELISA Kit
巴戟天染料法PCR鑒定試劑盒說明書 去木香內酯吐溫80 藥用級勞森試劑 97%Tetrameres americana
擬人參皂苷RT5氯酰氯 98%3-羥基苯硫酚 96%Theileria annulata
?；切廴パ跄懰?,4-二羥基苯醛 98%苯硫基酸酯 97%Theileria buffeli
原花青素B2 3,4-二羥基苯醛 分析標準品，≥99%4-氧基茴香硫醚 98%Theileria equi(Babesia equi)
原花青素B3丹皮酚 99%2-羥基茴香硫醚 98%Theileria lestoquardi
澤瀉醇-B-23-醋酸酯丹皮酚 分析標準品4-硫基苯酮 97%Theileria lowenshuni
竹葉香附素A大麥芽堿 分析標準品，≥99%4-硫基苯酸 98%Theileria mutans
紫杉葉素 苯酞 99%3-基苯并噻吩-2-羧酸 97%Theileria orientalis
派利文堿鹽酸水蘇堿 分析標準品2-巰基吡啶 98%Theileria parva
歐前胡素鹽酸水蘇堿 98%2-基苯并噻唑 98%Theileria sergenti
PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。
