商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6932 |
商品介紹:
測定意義
MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無脊椎動物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纖維化的程度。此外,MAO活性異常導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)運轉(zhuǎn)出現(xiàn)紊亂,從而引發(fā)多種病癥。
測定原理:
MAO催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進一步氧化成酸;底物在360nm處有特征吸收峰,測定360nm光吸收下降的速率,計算MAO活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
茴香 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99% (GC)位辛內(nèi)酯 99%Anti-Phospho-CDC42 (Ser71) /FITC 熒光素標(biāo)記化分化周期CDC42蛋白抗體IgG
茴香 ≥98%, FCC位辛內(nèi)酯 98%, FCC,KosherAnti-Jagged1/CD339 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Jagged1/CD339抗體IgG
香茅 96%丁位辛內(nèi)酯 98%Anti-CDK1/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激1抗體IgG
香芹酮 99%丁位十一內(nèi)酯 98%Anti-CDK2/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激2抗體IgG
癸 97%2- CP(劇品)Anti-CDK3 /FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激3抗體IgG
肉桂酸乙酯 99%2- GR(劇品)Anti-CDK4/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激4抗體IgG
99%2- Standard for GC(劇品)Anti-CDK5/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激5抗體IgG
檸檬 97%鎢 99.95%,0.5mm 直徑Anti-CDK6/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激6抗體IgG
單胺氧化酶(MAO)可見分光光度法檢測試劑盒馬白蛋白(Albumin)免疫試劑盒進口、分裝
唾液酸(SA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
兔子Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒*直銷
小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒進口、組裝
豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒*直銷
大鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠肌酸激同工BB(CK-BB)免疫試劑盒*直銷
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒進口、分裝
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。