中文名稱 磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體
英文名稱 Anti-phospho-eIF4E(Ser209)
濃 度: 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Daniorerio
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 24kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human eIF4E around the phosphorylation site of Ser209 [SG(p-S)TT]
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
別 名 EIF4F; CBP; eIF 4F 25 kDa subunit; CBP; eIF 4E; eIF 4F 25 kDa subunit; EIF 4F; EIF4E1; EIF4EL1; EIF4F; Eukaryotic Translation Initiation Factor 4 E; Eukaryotic translation initiation factor 4E like 1; Messanger RNA Cap Binding Protein eIF 4E.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.1ml/100μg |
貨號 | YSRIBIO-018274 |
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳suan氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
N-叔丁氧羰基-O-芐基-反式-4-羥基-L-脯氨 98%封閉蛋白25(CLDN25)ELISA試劑盒鳥氨脫羧1檢測試劑盒
叔丁氧羰?;涟倍h(huán)己鹽 ≥98.5%封閉蛋白24(CLDN24)ELISA試劑盒精氨代琥珀合成1檢測試劑盒
BOC-4-氨基-L-苯氨 98%封閉蛋白23(CLDN23)ELISA試劑盒肝性磷檢測試劑盒
Boc-4-氨基-D-苯氨 98%封閉蛋白22(CLDN22)ELISA試劑盒分泌磷蛋白2檢測試劑盒
BOC-L-4-氯苯氨 98.5%封閉蛋白20(CLDN20)ELISA試劑盒拉薩熱病IgG抗體檢測試劑盒
BOC-D-4-氯苯氨 96%封閉蛋白2(CLDN2)ELISA試劑盒γ-分泌亞單位檢測試劑盒
BOC-D-4-氟苯氨 99%封閉蛋白19(CLDN19)ELISA試劑盒泛特異性蛋白檢測試劑盒
BOC-L-4-氟苯氨 99%封閉蛋白17(CLDN17)ELISA試劑盒對氧磷3檢測試劑盒
Boc-4--L-苯氨 99%封閉蛋白16(CLDN16)ELISA試劑盒癌抗原27-29檢測試劑盒
Boc-4-甲氧基-L-苯氨 98%封閉蛋白15(CLDN15)ELISA試劑盒糖類抗原72-4檢測試劑盒
BOC-L-4-氨 98%封閉蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒珠蛋白A檢測試劑盒
BOC-D-4-氨 98%封閉蛋白12(CLDN12)ELISA試劑盒肉棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1檢測試劑盒
N-叔丁氧羰基-S-(4-)-D-青霉二環(huán)己基 ≥98.5% 封閉蛋白11(CLDN11)ELISA試劑盒脂酰COA脫氫檢測試劑盒
BOC-D-苯甘氨 98%封閉蛋白10(CLDN10)ELISA試劑盒烯酰-CoA水合檢測試劑盒
BOC-N-甲基-D-氨 98%封閉蛋白1(CLDN1)ELISA試劑盒硫解檢測試劑盒
Anti-phospho-eIF4E(Ser209)抗體anti-Melamine 三聚抗體
Anti-Melamine 三聚單克隆抗體
抗K3蛋白抗體
Anti-MCKD2/UMOD 尿調(diào)節(jié)蛋白抗體
Anti-MCKD2/UMOD UMOD蛋白抗體
Anti-Batroxobin Protein 蛇巴曲抗體