商品屬性:
產品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6602 |
商品介紹:
測定意義
HK(EC 2.7.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是葡萄糖分解過程中的第一個關鍵酶,催化葡萄糖轉化為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。
測定原理
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
人促有絲分裂因子Bacillus subtilis subsp. subtilis整合素αVβ3檢測試劑盒
人轉錄因子抗體-1Bacillus subtilis subsp. subtilis整合素結合唾液蛋白檢測試劑盒
人抗鼠抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis正常T表達和分泌因子檢測試劑盒
人鈣離子通道抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis脂阿拉伯甘露聚糖檢測試劑盒
人溴脫氧核苷尿嘧Bacillus subtilis subsp. subtilis脂蛋白α檢測試劑盒
人纖維母表面抗原Bacillus subtilis subsp. subtilis脂蛋白磷脂A2檢測試劑盒
人分泌性白蛋白抑制因子Bacillus subtilis subsp. subtilis脂蛋白脂檢測試劑盒
人阿黑皮素原Bacillus subtilis subsp. subtilis脂多糖;內素檢測試劑盒
己糖激酶(HK)紫外分光光度法檢測試劑盒氫二,三水 99.99% metals basisP抗體AQP2 水通道蛋白-2抗體
二氫 for cell culture, for insect cell culture,≥99%絲氨/蘇氨激蛋白PIM1+PIM3抗體AQP1/CHIP 水通道蛋白1抗體
二氫 for plant cell culture, ≥99%胞漿蛋白PACSIN3抗體AQP0/MIP26 水通道蛋白0抗體
二氫 for molecular biology, ≥99%跨膜接頭蛋白PAG抗體AP-TNAP/ALPL 堿性抗體
二氫 for HPLC,≥99.5% (T)PARD6G蛋白抗體APS APS抗體
三聚鈉 AR,98%胎盤蛋白6抗體APRIN/PDS5B 雄激素誘導增殖抑制蛋白抗體
三聚鈉 CP,97%肌3激接頭蛋白1抗體APR3/C2orf28 凋亡相關蛋白3抗體
二氫鈉 ARPRAM1蛋白抗體APPL1 銜接因子蛋白含pH域酪氨結合域和亮氨拉鏈蛋白1抗體
二氫鈉 CP廣譜角蛋白PCK抗體APPD/LAPF 凋亡誘導蛋白D抗體
二氫鈉 用于分子生物學, ≥99.0% (T)Rho鳥甘轉運蛋白抗體APP695 (CT) 淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端)
二氫鈉 ACS化脂酰肌激抗體APP/ABPP 淀粉樣肽前體蛋白抗體
無水二氫鈉 AR,99.0% 化帕金蛋白抗體APP/ABPP APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體
無水二氫鈉 CP,98.0%化帕金蛋白抗體Apoptosis enhancing nuclease 凋亡增強核抗體
無水二氫鈉 99.999% metals basis化血小板源性生長因子受體B抗體Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白抗體
無水二氫鈉 用于分子生物學, ≥99%化血小板源性生長因子受體B抗體APOL6 載脂蛋白樣蛋白6抗體
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。