產(chǎn)品名稱(chēng) | HCT116人結(jié)腸癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | A01X735 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HCT116:HCT116 |
分類(lèi) | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
別稱(chēng) | HCT-116 |
種屬 | 人類(lèi) |
年齡（性別） | 男性，48歲 |
組織來(lái)源 | 結(jié)直腸癌 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡(jiǎn)介 | HCT 116細(xì)胞是由M·Brattain等人于1979年從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞中的一株。HCT 116細(xì)胞在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克?。?/span>HCT 116細(xì)胞在無(wú)胸腺裸鼠有致瘤性，形成腫瘤結(jié)節(jié)。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時(shí)間 | ~25-48小時(shí) |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1B抗體 英文名；TAF1B 快速周期調(diào)節(jié)蛋白E5抗體
TIGIT抗體 英文名；TIGIT 賴(lài)氨酰氧化酶樣1抗體
TOMM20L蛋白抗體 英文名；TOMM20L 類(lèi)固醇5α還原酶1抗體(5α-Reductase 1)
TRIM23蛋白抗體 英文名；TRIM23 粒細(xì)胞分化相關(guān)標(biāo)志物MYADM抗體
TRK融合基因蛋白抗體 英文名；TFG 淋巴細(xì)胞胞漿蛋白LCP1抗體
T淋巴細(xì)胞白血病同源蛋白2抗體 英文名；TLX2 磷酸二羥丙酮酰基轉(zhuǎn)移酶抗體
T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病蛋白1抗體 英文名；Tal1 磷酸化14-3-3 β/ζ抗體
P-鈣粘附分子抗體 英文名；P-cadherin 鉀離子通道KIR2.3抗體
HCT116人結(jié)腸癌細(xì)胞Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys37) antibody 英文名； 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白20抗體
RAGE重組兔單克隆抗體 英文名；RAGE 間隙連接蛋白31.1/GJB5抗體
RasGTP酶激活蛋白IQGAP3抗體 英文名；IQGAP3 剪接體相關(guān)蛋白155抗體
Ras蛋白腦組織樣蛋白1抗體 英文名；RHEBL1 劍蛋白p80抗體
RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab5B單克隆抗體 英文名；RAB5B 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體
RGAG4蛋白抗體 英文名；RGAG4 酵母肌動(dòng)蛋白（內(nèi)參）抗體
Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 英文名；ROCK1 結(jié)構(gòu)蛋白家族3抗體
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過(guò)大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
