產(chǎn)品名稱(chēng) | Snu-1人胃癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | A01X968 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | Snu1:Snu-1 |
分類(lèi) | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
別稱(chēng) | SNU1 |
種屬 | 人類(lèi) |
年齡(性別) | 男性,44歲 |
組織來(lái)源 | 胃癌,腹水 |
生長(zhǎng)特性 | 半貼半懸 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡(jiǎn)介 | SNU-1細(xì)胞是由J·Park與其同事在1984年從細(xì)胞毒性治療前取出的低分化原位胃癌中建立的細(xì)胞株。SNU-1細(xì)胞L-多巴脫羧酶(DDC)表達(dá)陰性、VIP受體表達(dá)陽(yáng)性,但胃受體缺失。沒(méi)有注意到SNU-1細(xì)胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受體基因的擴(kuò)增或重排的證據(jù)。SNU-1細(xì)胞表達(dá)的c-myc和c-erb-B-2 RNA水平與其它細(xì)胞株相當(dāng)。以下基因在SNU-1細(xì)胞中不表達(dá):N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2及胃泌素釋放肽。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-5971 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿(mǎn) 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域重組兔單克隆抗體 英文名;MLKL1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框177抗體 英文名;C1orf177
活化B淋巴細(xì)胞因子1抗體 英文名;MSC/Musculin1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框180抗體 英文名;C1orf180
活化T細(xì)胞核因子1蛋白抗體 英文名;NFAT21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框181抗體 英文名;C1orf181
活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體 英文名;NFAT51號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框182抗體 英文名;C1orf182
活化T細(xì)胞核因子胞漿相互作用蛋白2抗體 英文名;NFATC2IP1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框183抗體 英文名;C1orf183
活化白細(xì)胞粘附分子抗體 英文名;CD1661號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框185抗體 英文名;C1orf185
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-2抗體 英文名;Caspase-2 p131號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框186抗體 英文名;C1orf186
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3單克隆抗體 英文名;Caspase-31號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框187抗體 英文名;C1orf187
Snu-1人胃癌細(xì)胞活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體 英文名;Caspase-31號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框189抗體 英文名;C1orf189
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗體 英文名;caspase-3 p12 subunit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框190抗體 英文名;C1ORF190
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3重組兔單克隆抗體 英文名;Caspase-31號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框191抗體 英文名;C1orf191
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-9抗體 英文名;Caspase-91號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框192抗體 英文名;C1orf192
活化蛋白激酶B抗體 英文名;JunB1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框195抗體 英文名;C1orf195
活化蛋白激酶B重組兔單克隆抗體 英文名;JunB1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框198抗體 英文名;C1orf198
活化蛋白激酶D抗體 英文名;Jun D1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體 英文名;TSEN15/C1orf19
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過(guò)大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。