公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
名稱 | SNU-1 (人胃癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | SNU1; NCI-SNU-1 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 男性,44歲 |
組織來(lái)源 | 胃癌,腹水 |
生長(zhǎng)特性 | 半貼半懸 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景描述 | SNU-1細(xì)胞是由J·Park與其同事在1984年從細(xì)胞毒性治療前取出的低分化原位胃癌中建立的細(xì)胞株。SNU-1細(xì)胞L-多巴脫羧酶(DDC)表達(dá)陰性、VIP受體表達(dá)陽(yáng)性,但胃受體缺失。沒(méi)有注意到SNU-1細(xì)胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受體基因的擴(kuò)增或重排的證據(jù)。SNU-1細(xì)胞表達(dá)的c-myc和c-erb-B-2 RNA水平與其它細(xì)胞株相當(dāng)。以下基因在SNU-1細(xì)胞中不表達(dá):N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2及胃泌素釋放肽。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-5971 |
細(xì)胞傳代:
1. Snu-1人胃癌細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備:200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號(hào)筆,培養(yǎng)皿,離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液,消化 1 分鐘(37℃,5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來(lái)為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸,使細(xì)胞分散開(kāi)。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染:
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中,震蕩 10 秒鐘,溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在-20 攝氏度保存,使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA 質(zhì)量)來(lái)轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無(wú)血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA,震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,再次震蕩。
ASMTL蛋白封閉多肽 | 似血矛線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒直銷 |
腦膜炎奈瑟菌PCR試劑盒 | 分揀連接蛋白7ELISA試劑盒 |
人并殖吸蟲(chóng)抗體(IgG)ELISA試劑盒 | 防御suβ103BELISA試劑盒 |
人G蛋白偶聯(lián)雌激su受體1(GPR30)檢測(cè)試劑盒elisa | 動(dòng)力蛋白激活蛋白2ELISA試劑盒 |
人補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 | 芳基硫suan酯meiBELISA試劑盒 |
人β,β胡蘿卜su9',10'加氧mei(BCO2)試劑盒ELISA | B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子εELISA試劑盒 |
間變性淋巴瘤激mei核相互作用伴侶蛋白封閉多肽 | 鼻疽伯克霍爾德氏菌PCR試劑盒 |
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框135封閉多肽 | 腦膜炎奈瑟菌群PCR檢測(cè)試劑盒 |
DNAJC2蛋白封閉多肽 | 牡蠣包拉米蟲(chóng)PCR試劑盒 |
整合suβ7封閉多肽 | 新城疫病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒 |
DNA依賴蛋白激mei催化亞基封閉多肽 | 牛布魯氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
β淀粉樣蛋白結(jié)合蛋白封閉多肽 | Snu-1人胃癌細(xì)胞尼泊爾葡萄球菌PCR試劑盒 |
p19ARF抑癌基因封閉多肽 | 腦膜炎敗血金黃桿菌PCR試劑盒 |
磷suan化6丙酮酰四氫蝶呤合成meiPTPS封閉多肽 | 牛鼻炎病毒通用 RT-PCR試劑盒 |
組織相容性抗原DQB2封閉多肽 | 牛赤羽病病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:
①進(jìn)無(wú)菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開(kāi)始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕,安裝吸管帽、打開(kāi)或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼,以防退火;燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用;已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過(guò)火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng),以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過(guò)早開(kāi)瓶,開(kāi)瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過(guò)早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話,咳嗽以防止來(lái)自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí),應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來(lái)的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。