公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | A01X863 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | MRC5:MRC-5（） |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | MRC5 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 胎兒,14周齡 |
組織來源 | 肺 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
詳情簡介 | MRC-5細胞來自14周齡男性胎兒的正常肺組織；MRC-5細胞老化前能傳代42-46次群體倍增。MRC-5細胞是正常二倍體細胞系，46條染色體、XY核型。模式染色體數(shù)為46，概率為70%。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | MEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~36-96小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶8抗體 英文名；CHST9PerCP標記人HLA-DR單克隆抗體 英文名；human HLA-DR/PerCP
碳水化合物激酶結構域蛋白質(zhì)抗體 英文名；CARKDPerCP標記人IFN-γ單克隆抗體 英文名；human IFN-γ/PerCP
碳酸酐酶10抗體 英文名；CA10PERQ1蛋白抗體 英文名；GIGYF1
碳酸酐酶11抗體 英文名；CA XIPescadillo抗體 英文名；Pescadillo
碳酸酐酶12抗體 英文名；CA12PEST含核蛋白抗體 英文名；PCNP
碳酸酐酶13抗體 英文名；CA13PE標記大鼠CD8a單克隆抗體 英文名；Rat CD8a/PE
碳酸酐酶1抗體 英文名；CA IPE標記的前列腺素E受體蛋白4抗體 英文名；EP4, PE conjugated
碳酸酐酶1重組兔單克隆抗體 英文名；Carbonic Anhydrase IPE標記的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體 英文名；ACE2, PE conjugated
碳酸酐酶2抗體 英文名；CA IIPE標記人/小鼠CD11b單克隆抗體 英文名；human/mouse CD11b/PE
碳酸酐酶3抗體 英文名；Carbonic anhydrase 3PE標記人/小鼠CD45R單克隆抗體 英文名；human/mouse CD45R/PE
MRC-5（有限細胞系）人胚肺成纖維細胞碳酸酐酶4抗體 英文名；CAIV/Carbonic Anhydrase IVPE標記人/小鼠ZAP-70單克隆抗體 英文名；human/mouse ZAP-70/PE
碳酸酐酶6抗體 英文名；CA6PE標記人Bcl-2單克隆抗體 英文名；human Bcl-2/PE
碳酸酐酶7抗體 英文名；CA7PE標記人CD103 (ITGAE)單克隆抗體 英文名；human CD103 (ITGAE)/PE
碳酸酐酶9單克隆抗體 英文名；CA9PE標記人CD105單克隆抗體 英文名；human CD105/PE
碳酸酐酶9抗體 英文名；CA9PE標記人CD106單克隆抗體 英文名；human CD106/PE
碳酸酐酶相關蛋白/腦蛋白10抗體 英文名；CA10PE標記人CD107a單克隆抗體 英文名；human CD107b/PE
碳酸酐酶相關蛋白8抗體 英文名；CA8PE標記人CD10單克隆抗體 英文名；human CD10/PE
羰基還原酶1抗體 英文名；CBR1PE標記人CD117 (c-kit)單克隆抗體 英文名；human CD117 (c-kit)/PE
