培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96883 |
商品介紹：
名稱 HMEC-1 (微血管內(nèi)皮細(xì)胞) 別稱Hmec-1; HMEC1; CDC/EU.HMEC-1; Human Microvascular Endothelial Cell line-1 年齡（性別）男；新生兒 組織來源微血管內(nèi)皮 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述Microvascular endothelial cells isolated from human foreskins were transfected with pSVT vector, a pBR-322 based plasmid containing the coding region for Simian virus 40A gene product, large T antigen. 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基Complete Growth Medium for HMEC-1 推薦傳代比例1:3-1:5 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H11N9
HMEC-1 (微血管內(nèi)皮細(xì)胞) 2 ug pYFP-Gogi pYFP-Gogi 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
1袋 顯影粉 Developing Solution,Powder 室溫避光保存 0.312-20 ng/mL 人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA試劑盒
1瓶 NCI-H446株 NCI-H446 低溫運輸和保存
PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液（2015藥典） Buffered Sodium Chloride – Peptone Solution 250g
多價蛋白胨-酵母膏（PY）培養(yǎng)基 Poly Peptone Yeast Extract Medium 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human 2', 3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase
100mL Kinase Storage Buffer Kinase Storage Buffer 常溫保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Leucine-rich alpha-2-glycoprotein
30次 一站式蛋白質(zhì)非變性PAGE套裝（高pH 緩沖液套） One-Stop Protein Native PAGE Pack 常溫保存（上樣液需要-20℃保存） 15.6-1000 pg/mL 人補體成分9(C9)ELISA試劑盒
100g 鉀 Potassium Hydrogen Posphate 室溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human TN-C
1%NaCl蔗糖 20支類桿菌-膽汁-七葉甙（BBE）瓊脂進口、國產(chǎn)BBE Agar用于脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)250
250mg 潮B干粉 Hygromycin B Powder 4℃避光保存 0.156-10 ng/mL 人磷脂爬行1(PLSCR1)ELISA試劑盒
2 ug pPICZ C pPICZ C 低溫運輸，-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人胰彈性蛋白(ELA1)ELISA試劑盒
