服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
壞死性肝胰腺炎細(xì)菌(NHPB)核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10384 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
極地考克氏菌培養(yǎng)基: 471大洋細(xì)菌水樣/大洋表層水樣提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
HBUM171053模式菌株: no安全等級(jí): 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃
紫穗槐中慢生根瘤菌培養(yǎng)基: 0063模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28-30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
CBS345.48=ATCC10464模式菌株: yes安全等級(jí): 1種屬: Eupenicillium levitum泥土提供形式: 斜面用于《含水化妝品中防腐劑標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法》實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。
綠色木霉生長(zhǎng)條件: 28-30℃培養(yǎng)基: CM0091提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
熒光假單胞菌生物型F產(chǎn)脂肪酶模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 26-30℃
-455℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
匍枝根霉(黑根霉)培養(yǎng)基: 0014甾體激素提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
木霉屬以蔗渣、秸稈、農(nóng)副產(chǎn)品、工廠纖維素廢渣為底物纖維素霉曲(即纖曲),酶解粗飼料。模式菌株: no腐木提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0756生長(zhǎng)條件: 28-30℃
43642研究模式菌株: no種屬: Mycobacterium│Mycobacterium farcinogenes提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3生長(zhǎng)條件: 37 真空冷凍干燥法
平菇生長(zhǎng)條件: 28-30培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no 定期移植法
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077面包酵母。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
43510研究模式菌株: no種屬: Mycobacterium│Mycobacterium gordonae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3生長(zhǎng)條件: 37 真空冷凍干燥法
-456℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
FRI2008042模式菌株: no安全等級(jí): 1種屬: Serratia│entomophila天牛腸道提供形式: 凍干物飼料用纖維素酶、植酶、木聚糖酶等的篩選培養(yǎng)基: 0002
泡囊側(cè)耳生長(zhǎng)條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
環(huán)己酮CyclohexanoneAR500ml
E803-100GL-Isoleucine L-異亮安 (異白安)73-32-5100g34
MJ573-1GMEGA-8
NP-40裂解液100ml
MOPS, Free Acid500g
正辛烷N-octaneGCS2ml
SCT-050-A-S0.5 ml 螺口尖底凍存管(雜色)(已滅菌)(帶蓋)234
S9007-1GSpectinomycin 鹽壯觀霉素22189-32-81g
Cytochrome C, from bovine heart
β-Mercaptoethanol10x100ml
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 ,英文名: TAP ELISA Kit
人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAi-adrenocoicalaibody,AAAELISAKit 96T/48T
大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒 Rat α2 macroglobulin,α2 MG ELISA Kit
CLIAKitforST1(HumanSomelysin-1)ELISAKit人基質(zhì)裂解素規(guī)格:48T/96T
人血液補(bǔ)體蛋白C4免疫比濁法定量檢測(cè)試劑盒20次
人抗IVIgG抗體ELISAKit人抗IVIgG抗體ELISAKit,48T/96T人抗IVIgG抗體ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T
壞死性肝胰腺炎細(xì)菌(NHPB)核酸檢測(cè)試劑盒UBA 培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于啤酒中厭氧菌檢測(cè)
葡萄糖發(fā)酵管(軍團(tuán)菌)規(guī)格:20支用途:用于軍團(tuán)菌檢測(cè)
D-環(huán)絲氨規(guī)格:0.2g用途:每0.1g加入250gml TSC瓊脂基礎(chǔ)中
50%卵黃乳液規(guī)格:用途:作為添加劑添加于培養(yǎng)基中
MS培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)規(guī)格:250g用途:用于植物組織培養(yǎng)(不含瓊脂和蔗糖)
伊紅Y(曙紅Y)規(guī)格:25g用途:微生物指示劑
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。