參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P10416
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現(xiàn)性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的。
植物乳桿菌培養(yǎng)基: 6模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
-532℃冰箱凍結；真空冷凍干燥
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077酒精釀造提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結法
AS1.2620＝ATCC15442=DSM939=NCIMB10421測定抗菌防腐劑，紡織品的細菌耐藥性檢測，藥效試驗，質量控制菌株。模式菌株: no種屬: Pseudomonasaeruginosa動物房水的瓶子安全等級: 1培養(yǎng)基: 2、109生長條件: 37℃
白色鏈霉菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0012提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法
熒光假單胞菌分類、研究，具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28℃
不解糖假蒼白桿菌潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群模式菌株: no沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃
哲拉什黃桿菌產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株模式菌株: no沉積物/深灰色沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 15℃
-533℃冰箱凍結；真空冷凍干燥
傳染性法氏囊病病用于科研模式菌株: no病雞提供形式: 凍結物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
DH5α（含pUC19質粒）大腸桿菌培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基，含50μg/mL氨芐青霉素鈉。
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min滅菌。 滅菌結束，冷卻降溫后加入氨芐青霉素鈉，使培養(yǎng)基中氨芐青霉素鈉終含量為50μg/mL。pUC19質粒提取。提供形式: 西林瓶，菌片安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ ，好氧 -20℃避光保存；運輸條件：常溫運輸。
ATCC19258巴氏滅菌典型株。模式菌株: no種屬: Streptococcus│thermophilus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0503生長條件: 37℃
沙福芽孢桿菌培養(yǎng)基: 33共生微生物/野生鯔魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶（三丁甘油酯）、蛋白酶、纖維素酶生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法
美味牛肝菌食用菌模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 150生長條件: 28-30
白色假絲酵母生長條件: 28℃安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 13
-534℃冰箱凍結；真空冷凍干燥
硫化鈉(陰涼)wo7ium sulfide (cool)AR500g
AAL03-1KGDL-Arginine DL-精安鹽鹽1119-34-287
CA2021-25mgAmphotericin B,solubilized 可溶性兩性霉素B1397-89-325MG
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)2ml
Nalidixic Acid250g
價甲酯metxyl formate色標10ml
ER0503HindIII, HC25000 units13
GE859-1GG-418 sulfate [Geneticin]108321-42-21g
Dextran Sulfate50g
6-安基已6-aminocaproic acidBR25g
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白5(IGFBP-5)ELISA試劑盒 ，英文名： IGFBP-5 ELISA Kit
人抗核仁抗體(ANA)ELISA檢測試劑盒Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit 96T/48T
大鼠β-防御素(β-Defensins)免疫試劑盒 Rat β-Defensins ELISA Kit
CLIAKitforSyk(Humanspleeyrosinekinase)ELISAKit人脾臟酪氨激酶規(guī)格：48T/96T
人體N-乙酰轉移酶1(NAT1)活性熒光定量檢測試劑盒20次
ELISAKitAb人抗促甲狀腺素受體抗體規(guī)格：48T/96T
沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測試劑盒柴胡皂苷B中文別名：柴胡皂甙B
英文名：Saikosaponin B
登錄號：新品待定
分子結構：
外觀：白色粉末
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：傘形科植物阿爾泰柴胡Bupleurum krylovianum Schischk.ex Kryl.
溶解性：可溶于水，不溶于等有機溶劑。
藥理藥效：抗炎、抗病、抗腫瘤。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。
