Hi T7高產(chǎn)RNA合成試劑盒
商品屬性：
產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號 |
RNA相關(guān)產(chǎn)品 | 25T | BJ-PJ6634 |
商品介紹：
描述：Hi T7 高產(chǎn) RNA 合成試劑盒可在體外高效合成多種類 型的 RNA 如 mRNA、lncRNA、shRNA 等。利用 Hi T7 RNA 聚合酶識(shí)別 T7 promoterTTCTAATACGACTCACTATAG G）以方框中 G 堿基為起點(diǎn)開始轉(zhuǎn)錄，該試劑盒可以從少量 樣本得到高效轉(zhuǎn)錄，單次反應(yīng)可獲得高達(dá) 150-200 μg 的產(chǎn) 物，轉(zhuǎn)錄長度可達(dá) 4000nt 以上。 利用該試劑盒得到的 RNA 適用于多種下游應(yīng)用，如 RNA 結(jié)構(gòu)和功能研究、核酸酶生物化學(xué)研究、RNase 保護(hù) 分析探針、印跡雜交、反義 RNA 及 RNAi 實(shí)驗(yàn)、微陣列 分析、顯微注射、體外翻譯和 RNA 疫苗等。 Hi T7 高產(chǎn) RNA 合成試劑盒使用方便，使用優(yōu)化好的預(yù) 混液，有利于用戶快速建立反應(yīng)。本試劑盒還配備了 DNase I，在 RNA 合成完畢后可快速去除 DNA 模板，便于獲得高 純度轉(zhuǎn)錄 RNA。
組分：
(1) 2×Hi T7 Trans Solution 中包含反應(yīng) Buffer、rNTP。
(2) T7 Trans Enzyme Mix 中包含 Hi T7 RNA 聚合酶、
Rnase Inhibitor 等。
保存：
-20℃可保存 2 年，避免反復(fù)凍融。
操作步驟：
（1） 按以下組分配制反應(yīng)液
2×Hi T7 Trans Solution 10 μl
DNA（RNase Free） 0.5~1 μg
Hi T7 Trans Enzyme Mix 1.5 μl
RNase Free H2O upto 20 μl
（2）37℃反應(yīng) 4h，轉(zhuǎn)錄 RNA 產(chǎn)量在 120~200 μg。
（3） 轉(zhuǎn)錄完畢后，向反應(yīng)液中加入 2.5 μl 的 10xRD Buffer和 2 μl 的 RNase Free DNase I，37℃孵育 15min，以去除DNA 模板。
（4）整個(gè)反應(yīng)完畢后可取 0.05~0.1 μl 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測，并凍存于-80℃保存。選用 LiCl 沉淀純化或 5min RNAPurification Kit 進(jìn)行轉(zhuǎn)錄 RNA 的純化，以去除鹽、rNTP、蛋白等。
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