培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97241 |
商品介紹:
名稱 腎皮質(zhì)上皮細胞 2.組織來源:腎組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人腎皮質(zhì)上皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。 5.方法簡介: ()實驗室分離的人腎皮質(zhì)上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: ()實驗室分離的人腎皮質(zhì)上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H063 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
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小鼠白介素22(IL-22)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
山羊免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒進口、分裝
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人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)免疫試劑盒進口、組裝
人淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結合家族B成員1(FE65)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
人AP-5復合物β亞基(PP1030)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
貓血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠細胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫試劑盒進口、組裝
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腎皮質(zhì)上皮細胞Aspergillus spp. 曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-2周HSL/LIPE 荷爾蒙敏脂肪抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-NR1D1(Ser55/59) 磷酸化細胞核受體Rev-Erbα抗體 規(guī)格: 0.1ml
Fructus hordei germinatus麥芽探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周BNIP2 Bcl2相互作用蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy3 Cy3標記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1,Superbug)新德里超級細LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周EGFL7 類表皮生因子域7抗體 規(guī)格: 0.1mlTransthyretin 轉(zhuǎn)甲狀素蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Bonamia ostreae牡蠣包拉米蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-c-Raf(Ser259) 磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1mlWSTF 轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體 規(guī)格: 0.2ml
Duck Hepatitis B Virus cccDNA(DHBV cccDNA)鴨乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IGSF11 大腦和睪特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-p90RSK (Thr573) 磷酸化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
麝源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周RASSF7 RAS家族關聯(lián)結構域蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2mlGCDGP15/SABP 囊性組織液體蛋白15抗體 規(guī)格: 0.1ml
Globicatella sanguinis血球鏈探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 規(guī)格: 0.1mlADAR1 (N-terminus) 雙鏈RNA苷酸脫氨基抗體(N端) 0.2ml
Phoma tracheiphila檸檬干枯病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周MIC1/C18orf8 結腸相關蛋白MIC1抗體 規(guī)格: 0.2mlDNAJB4/HSP40 homolog 熱休克蛋白家族40抗體 規(guī)格: 0.1ml
Fructus cannabis火麻仁PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周PRL1/PTP4A1 肝再生磷酸酯1抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
Avian Paramyxovirus 1(APMV)禽副粘病毒1型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CD158b2 NK細胞抑制性受體2DL3抗體 規(guī)格: 0.2mlKLHL23 Kelch樣蛋白23抗體 規(guī)格: 0.2ml