乳腺上皮細胞公司正在出售的產品：臍帶間充質干細胞微小RNA 英文名稱：HUMSC miRNA 規(guī)格:1 µg2 µg5 µg
肺間充質干細胞微小RNA 英文名稱：HPMSC miRNA 規(guī)格:1 µg2 µg5 µg
乳腺上皮細胞微小RNA 英文名稱：HMEpiC miRNA 規(guī)格:1 µg2 µg5 µg
乳腺成纖維細胞微小RNA 英文名稱：HMF miRNA 規(guī)格:1 µg2 µg5 µg
產品屬于：
產品名稱：乳腺上皮細胞
產品規(guī)格：5×105
貨號：FS-01X9847
產品類型：原代細胞
單位：T25/瓶
提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度（℃）：37
運輸溫度（℃）：常溫
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞 在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。 2.研究條件可以人為控制 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。 3.研究的樣本可以達到比較均一性 通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。 4.研究內容便于觀察、檢測和記錄 采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。 2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。 3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。 4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。 6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。 7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠Ⅰ型前膠原羧基端(PⅠCP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠可溶性P選擇(sP-selectin)ELISA試劑盒英文名稱：Rat soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠白介1(IL-1)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
大鼠白介1β (IL-1β)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠血栓B2(TXB2)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠乙酰(Ach)ELISA試劑盒英文名稱：Rat acetylcholine,ACH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠促甲狀腺釋放(TRH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Anti-thyroid-globulin antibody,ATGA/TGAB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠促腎上皮質釋放(CRH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠促性腺釋放(GnRH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒英文名稱：Rat leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
大鼠腸脂肪結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
大鼠端粒(TE)ELISA試劑盒英文名稱：Rat telomerase,TE ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
乳腺上皮細胞KRG2/DDX11 角質細胞生長因子調節(jié)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
DSCC1 DSCC1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-CARM1(Ser228) 磷化蛋白精N甲基4抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-PRKAA2(Ser173) 腺單磷活化蛋白激α2抗體規(guī)格: 0.1ml
CAPG2/NCAPG2 染色體相關蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
APRIN/PDS5B 雄誘導增殖抑制蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
REC8 減數分裂重組蛋白家族REC8抗體規(guī)格: 0.2ml
SA1/Nuclear protein stromal antigen 1 粘結蛋白SA1抗體規(guī)格: 0.2ml
