產品名稱 | 小鼠胚胎肝細胞；BNL CL.2 | 貨號 | AXB10091 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | BNL CL.2：BNLCL2 |
分類 | 小鼠系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | BNL-CL.2 |
種屬 | 小鼠 |
年齡（性別） | 胚胎 |
組織來源 | 肝 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
詳情簡介 | BNL CL.2細胞是在用鳥和苯丙代替和的平板上選擇建立的細胞株；檢測表明，BNL CL.2細胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
致瘤性 | No, the cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium. |
別稱公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品：
AF488標記人CD25單克隆抗體劍蛋白p80抗體 英文名；katanin p80
AF488標記人CD33單克隆抗體腱糖蛋白R抗體 英文名；Tenascin R
AF488標記人CD44單克隆抗體腱糖蛋白X抗體 英文名；TNXB
AF488標記人CD56 (NCAM)單克隆抗體腱調蛋白/軟骨調節(jié)素樣1蛋白抗體 英文名；TNMD
AF488標記人CD95單克隆抗體降鈣素單克隆抗體 英文名；CALCA
AF488標記小鼠CD107a單克隆抗體降鈣素基因相關肽1/2抗體 英文名；CGRP-1/2
AF555標記的程序性死亡配體1抗體降鈣素基因相關肽1抗體 英文名；CGRP-I
AF555標記的孤兒核受體蛋白Nur77抗體降鈣素基因相關肽1型受體抗體 英文名；CALCRL
AF555標記的網格蛋白重鏈抗體降鈣素基因相關肽2抗體 英文名；CGRP-II
小鼠胚胎肝細胞；BNL CL.2AF555標記的信號轉導和轉錄激活因子5抗體降鈣素基因相關肽受體CRCP抗體 英文名；CRCP
AF555標記的血管內皮細胞生長因子受體3抗體降鈣素抗體 英文名；Calcitonin
AF555標記的轉錄因子Pax6抗體降鈣素受體抗體 英文名；Calcitonin receptor
AF594標記的程序性死亡配體1抗體降鈣素原單克隆抗體 英文名；Procalcitonin(PCT)
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
