產(chǎn)品名稱 | 小鼠神經(jīng)細胞;CATH.a | 貨號 | AXB10493 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | CATH.a:CATHa |
分類 | 小鼠細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
生長特性 | 半貼半懸 |
細胞形態(tài) | 神經(jīng)細胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640+8% HS+ 4% FBS+1% P/S |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存條件 |
凍存液 | :55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)條件 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
PAF(Mouse platelet activating factor) ELISA Kit 小鼠血小板活化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Cdc6/FITC 熒光素標(biāo)記細胞分裂周期蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
TUNEL 細胞凋亡原位檢測試劑盒(我公司提供代測服務(wù)) 50人份
Mitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1 英文名稱: 酸脫氫酶激酶1抗體 0.1ml
ATXN3L 英文名稱: 小腦脊髓共濟失調(diào)蛋白3抗體 0.2ml
Anti-Cdc6/FITC 熒光素標(biāo)記細胞分裂周期蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
iFABP ELISA Kit 大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 熒光素標(biāo)記腺泡0酸化Acinus抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FGFR3/CD333 成纖維細胞生長因子受體3抗體 規(guī)格 0.1ml
omentin(Mouse omentin) ELISA Kit 小鼠網(wǎng)膜素 96T
MITF 英文名稱: MITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
Aspartate beta hydroxylase 英文名稱: 天門冬酸β羥化酶抗體 0.2ml
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 熒光素標(biāo)記腺泡0酸化Acinus抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IGFBP-3 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Apaf-1 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM78B FAM78B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
sCD14 ELISA Kit 大鼠可溶性CD14 96T
MIS12 英文名稱: 染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體 0.2ml
ACAT1 英文名稱: ?;D(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
Anti-Apaf-1 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-5(Mouse Interleukin 5) ELISA Kit 小鼠白介素5Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCR-2/5/FITC 熒光素標(biāo)記CC趨化因子受體2/5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EDG1/CD363/S1P1 內(nèi)皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體 規(guī)格 0.2ml
Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit 兔胰淀素 96T
MIR16 英文名稱: 膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體 0.2ml
3-Apr 英文名稱: 細胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
Anti-CCR-2/5/FITC 熒光素標(biāo)記CC趨化因子受體2/5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TE ELISA Kit 大鼠端粒酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Ack1/FITC 熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FGFR2/CD332 成纖維細胞生長因子受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
HNT-4(uman Neurotrophin 4) ELISA KIT 人神經(jīng)營養(yǎng)因子4 96T
MIP4 英文名稱: 巨噬細胞炎癥蛋白18抗體 0.1ml
小鼠神經(jīng)細胞;CATH.aASIC3 英文名稱: 酸敏感離子通道蛋白3抗體 0.1ml
Anti-Ack1/FITC 熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD57/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD57抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPY19L2 DPY19L2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TOXO IgG 弓形蟲抗體 IgG(間接法二步法)
Mineralocorticoid receptor 英文名稱: 鹽皮質(zhì)激素受體抗體 0.2ml
C3orf15 英文名稱: 3號染色體開放閱讀框15抗體 0.2ml
Anti-CD57/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD57抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。