培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96499 |
商品介紹：
名稱 P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞) 別稱P-388D1; P388-D1; P388.D1; P3 88 D1 種屬小鼠 年齡（性別）不詳 組織來源淋巴瘤 生長特性懸浮細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣 背景描述P388D1細(xì)胞來源于甲基膽蒽誘導(dǎo)形成的淋巴瘤；在LPS和佛波酯的誘導(dǎo)下，P388D1細(xì)胞可以產(chǎn)生IL-1，還可以產(chǎn)生；可以吞噬酵母多糖和乳膠微球，在抗體依賴的、細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒系統(tǒng)中有活性。P388D1細(xì)胞表面免疫球蛋白(sIg)陰性，鼠痘病毒陰性。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% HS＋1% P/S 推薦傳代比例2-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells). 注意事項(xiàng)該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請注意離心收集細(xì)胞懸液；請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
甲型流感 H3N8 (equine/Gansu/7/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H3N2 (Moscow/10/1999) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H3N2 (Babol/36/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H3N
P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)25g 琥珀酸鈉，六水 Sodium Succinic Hexahydrate 室溫保存 0.156-10 ng/mL 人11β羥基類固醇脫氫1型(HSD11b1) ELISA試劑盒
CCFA瓊脂基礎(chǔ) CCFA Agar Base 250g 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Visinin-like protein 1
DPD培養(yǎng)基 DPD Medium 250g 1.56-100 ng/mL 人血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒
2 ug pOPRSVI/MCS pOPRSVI/MCS 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.625-40 ng/mL 人心肌型蘭尼定受體2（hRYR-2）ELISA試劑盒
250mL RIPA Buffer without SDS RIPA Buffer without SDS 常溫保存 0.156-10 ng/mL 偽狂犬病毒(PRV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
1瓶 MRC-5株 MRC-5 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL 柯薩奇病毒A16型(CAV-16)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
吡多醇Y培養(yǎng)基 Pyridoxine Y Medium 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4
1g 鄰苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 o-Nitrophenyl-β-D-Galacto-Pyranoside（ONPG） -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human AP-1 complex subunit mu-1
50次 柱式動(dòng)物RNA-DNA雙提試劑盒
1 管 INVSc1酵母菌 INVSc1 Yeast Strain -80℃保存 0.156-10 ng/mL 人3-羥酰脫氫2(HCD2)ELISA試劑盒
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（2015藥典） 250g麥芽浸粉進(jìn)口、國產(chǎn)Malt extract250克BR
