培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96553 |
商品介紹:
名稱 TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細胞) 別稱TM-3 種屬小鼠 年齡(性別)雄性,11-13天 組織來源睪丸間質(zhì) 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述TM3細胞在LH作用下cAMP產(chǎn)量升高,但對促卵泡激素沒有響應。TM3細胞對LH的響應持續(xù)時間與血清批次有關(guān);在LH存在下,TM3細胞可以代謝。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM/F12+5% HS+2.5% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性No, The cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium. 受體表達情況luteinizing hormone (LH); epidermal growth factor (EGF); androgen receptor, positive; e種屬ogen receptor, positive; progesterone receptor, positive 基因表達情況prostaglandin F2a 注意事項該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為正常現(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
人 USP33 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 WWP2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 FOXM1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 CAPN1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 OS9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 DIDO1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 CTNNA1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 ALPP 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 IFIT5 基因全長ORF克隆
TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細胞)6.5%NaCl葡萄糖瓊脂 6.5% NaCl Dextrose Agar 250g 0.156-10 ng/mL 人親環(huán)素A(PPIA/CYPA) ELISA試劑盒
10mL 溶液,50mg/mL Spectinomycin Solution 4℃避光干燥保存 0.156-10 ng/mL 人細絲增強子1(EF1)ELISA試劑盒
100µL 小鼠抗GFP標簽單抗 Anti GFP-Tag Mouse MAb -20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Cathepsin L1
2 ug SD1211-chip- 3 SD1211-chip- 3 低溫運輸,-20℃保存 39-2500 pg/mL 人不均一核核糖核蛋白K(HNRPK)ELISA試劑盒
500mL Gelatin Blocking Buffer in TBS Gelatin Blocking Buffer in TBS 常溫保存LST肉湯進口、國產(chǎn)LST Broth250克各種食品中大腸菌群最近似值(MPN)測定
素B(2.25萬單位) 2.25萬單位*5支 0.625-40 ng/mL 口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
1套 硅膠膜DNA離心吸附柱(大提) Silica Spin Column Maxiprep 常溫 0.78-50 ng/mL 人分泌型卷曲蛋白1 (FRP-1)ELISA試劑盒
2 ug pYIP211 pYIP211 低溫運輸,-20℃保存
100mL TEA Buffer,0.2M,pH7.4 TEA Buffer,0.2M,pH7.4 常溫保存
2 ug pIZT/V5-His pIZT/V5-His 低溫運輸,-20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Gamma-enolase
2 ug pPICZα GB pPICZα GB 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL 人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒