培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96565 |
商品介紹:
名稱 YAC-1 (小鼠淋巴瘤細(xì)胞) 別稱Yac-1; YAC 種屬小鼠 年齡(性別)不詳 組織來源Moloney鼠科白血病毒(Mo-MuLV)感染;淋巴瘤 生長特性懸浮細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣 背景描述YAC-1是一個(gè)淋巴瘤細(xì)胞,將Moloney白血病病毒(MLV)接種到新生A/Sn小鼠中生成。YAC-1細(xì)胞對(duì)NK細(xì)胞的活動(dòng)敏感,對(duì)于NK細(xì)胞活性檢測(cè)十分有用。 生物安全等級(jí)2 生長培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~20小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 注意事項(xiàng)該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液;請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
人 BCAR3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 LOXL3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 CCR4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 PON3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 IL17F 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 ADAM17 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 MMP13 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 IL7R 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 BRCA1 基因全長ORF克隆
YAC-1 (小鼠淋巴瘤細(xì)胞)250mL RNase-Free Tris-HCl Solution(無RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH7.4 RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH7.4 常溫保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Reelin
2 ug SB D3 SB D3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50mL Cobalt Chloride Solution(氯化鈷溶液),0.5M Cobalt Chloride Solution,0.5M 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Brain-derived neurotrophic factor
0.5 g Lipoic acid(抗氧化劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Alpha-actinin-3
含接觸皿培養(yǎng)基平板(5.5cm) Contact Plate Medium 10個(gè)/包 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human 7, 8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase
50T 豬傳染性胃腸炎病毒定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒 TGEV Fluorescent RT-PCR Kit 低溫運(yùn)輸,-20℃保存馬丁肉湯進(jìn)口、國產(chǎn)馬丁肉湯1萬毫升/袋豬肺疫、牛肺疫、兔出敗等疫苗生產(chǎn)及檢驗(yàn)用
麥芽糖 20支 0.469-30 ng/mL ELISA Kit for Human Lysosomal-associated transmembrane protein 4B
25mg 多聚 -L- 賴 (3-7 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
2 ug pQBI-50-BFP pQBI-50-BFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Neuronal-specific septin-3
1000支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭(袋裝) 常溫精致蛋白胨進(jìn)口、國產(chǎn)Peptone(From porcine meat)500克BR
10mg apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Gap junction alpha-1 protein