產(chǎn)品公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | HT-22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 | 貨號(hào) | A01X1060 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HT22:HT-22 |
分類 | 小鼠細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
種屬 | 小鼠 |
年齡(性別) | 不詳 |
組織來源 | 大腦;海馬體 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)細(xì)胞樣 |
生物安全等級(jí) | 2 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:4-1:6 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit 兔子壞死因子αMulti-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-CXCL9/MIG/CMK/FITC 熒光素標(biāo)記γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DCK 脫氧胞苷激酶抗體 規(guī)格 0.2ml
AACT/PE 熒光素PE標(biāo)記胰 0.1ml
Lpin1 protein 英文名稱: Lpin1 抗體 0.2ml
萊克多巴胺單克隆抗體 小鼠單抗 0.1
Anti-CXCL9/MIG/CMK/FITC 熒光素標(biāo)記γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgAMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC 熒光素標(biāo)記抗cRaf/Raf1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Deltex-1 DTX1抗體 規(guī)格 0.2ml
Mouse IgM/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記小鼠IgM 0.1ml
LPCAT2 英文名稱: 0脂?;D(zhuǎn)移酶2抗體 0.2ml
三聚胺單克隆抗體 小鼠單抗 1
Anti-cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC 熒光素標(biāo)記抗cRaf/Raf1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NE (Rabbit neutrophil elastase) ELISA Kit 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-DRD5 receptor/FITC 熒光素標(biāo)記抗多巴胺受體-D5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cystatin B 胱抑素B/半胱蛋白酶抑制劑B抗體 規(guī)格 0.2ml
Guinea IgG (親和化) 豚鼠IgG 10mg
LPAP 英文名稱: 淋巴細(xì)胞0蛋酸酶相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Zfp91 白血病相關(guān)新基因抗體 規(guī)格 0.2ml
HT-22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞Anti-DRD5 receptor/FITC 熒光素標(biāo)記抗多巴胺受體-D5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TSHR(CT)/FITC 熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
卵黃蛋白原抗體 Anti-VTG 0.2ml
Phospho-MEK4 (Ser257) 英文名稱: 0酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體 0.1ml
LPA3 英文名稱: 溶血0脂酸受體蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(Tyr188) 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格 0.1ml
TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg