細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96509 |
商品介紹:
名稱 RAW 264.7 (小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 別稱RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7 種屬小鼠 年齡(性別)雄性,成年 組織來源Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤;單核細(xì)胞;巨噬細(xì)胞 生長特性貼壁細(xì)胞,不用消化 細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則形 背景描述RAW 264.7細(xì)胞源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤;sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW 264.7細(xì)胞不分泌可檢測到的病毒顆粒,XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。RAW 264.7細(xì)胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖,并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)RAW 264.7細(xì)胞分解紅血球,但對腫瘤靶細(xì)胞無作用。 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基DMEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:6~1:8 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~12-30小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 受體表達(dá)情況complement (C3) 抗原表達(dá)情況H-2d 基因表達(dá)情況lysozyme, H-2d; Tested and found negative for ectromelia virus (mousepox). 注意事項(xiàng)1、該細(xì)胞不建議使用消化,會刺激分化; 2、 超過3天不傳代細(xì)胞容易分化; 3、 培養(yǎng)時,存在少量分化細(xì)胞,屬于正?,F(xiàn)象。 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
人 PCSK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
人 PGA4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 PGA4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 FTO 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 FTO 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 RHOA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
RAW 264.7 (小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)1瓶 SUP-B15株 SUP-B15 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor-related protein 4
100mL SSPE溶液,20× SSPE, 20× 常溫 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 4
500mL MES SDS Running Buffer,20X MES SDS Running Buffer,20X 常溫保存 1.56-100 U/mL ELISA Kit for Human Beta-hexosaminidase subunit beta
0.4mg無菌水溶液 0.4mg/支*20衛(wèi)矛醇半固體瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)Dulcitol Semisolid Agar10克細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗(yàn)
500mL Blotto-Tween in PBS with azide Blotto-Tween in PBS with azide 常溫保存 0.78-50 ng/mL 人神經(jīng)調(diào)節(jié)肽K受體(NKR)ELISA試劑盒
50mL EGTA Solution(EGTA溶液),0.5M,pH8.0 EGTA Solution,0.5M,pH8.0 常溫保存
1瓶 OKT 11株 OKT 11 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL 人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因蛋白ELISA試劑盒
有機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基 Bacterial organophosphorus Medium 250g 0.312-20 ng/mL 人血漿蛋白C1抑制劑(SERPING1) ELISA試劑盒
100次 高載量PCR片段純化試劑盒 Maxi PCR Clean-Up Kit 常溫
2 ug pET-45b(+) pET-45b(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白1(PVRL1)ELISA試劑盒
BCYE-CYS瓊脂基礎(chǔ) BCYE-Cys Agar Base 100g 31.2-2000 pg/mL 人酪蛋白激II亞基alpha'ELISA試劑盒