培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96511 |
商品介紹：
名稱 RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞) 別稱RBL2H3; RBL 2H3; RBL.2H3 種屬大鼠 年齡（性別）不詳 組織來源外周血；化學(xué)誘變嗜堿性細(xì)胞；白血病 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 背景描述RBL-2H3細(xì)胞是1978年國立牙科研究所的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細(xì)胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細(xì)胞株。RBL-2H3細(xì)胞具有高親和力的IgE受體，通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。RBL-2H3細(xì)胞廣泛地用于研究肥大細(xì)胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細(xì)胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細(xì)胞分泌的不同方面，包括細(xì)胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號(hào)的FBS都支持細(xì)胞的生長，但在某些批號(hào)中FcERI集聚后脫?；酶?。另一株大鼠嗜堿性細(xì)胞株(RBL)不會(huì)脫粒化。 生物安全等級(jí)1 生長培養(yǎng)基MEM＋15%FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~50-60小時(shí) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 受體表達(dá)情況FcERI (Fc of IgE) 基因表達(dá)情況histamine |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 Vitronectin 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 CYP2D6 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 CYP2D6 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 HIF1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 HIF1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 OLFM4 基因全長ORF克隆
RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)50T 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Glypican-3
5g 3- 氨基 -9- 乙基咔唑 AEC (3-Amino-9-Ethylcarbazole) 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人 Sestrin 2蛋白(SESN2)ELISA試劑盒
125mL HEPES Lysis Buffer with NP-40,2X HEPES Lysis Buffer with NP-40,2X 常溫保存
2 ug pSE934 pSE934 低溫運(yùn)輸，-20℃保存Fraser 添加劑進(jìn)口、國產(chǎn)Fraser Supplement添加到HB4193中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)5ml*2支
培養(yǎng)基1（USP） 250g
5g B6 Vitamin B6 室溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Synaptophysin
125mL Phosphate Buffered RIPA with Glycerol，2X Phosphate Buffered RIPA with Glycerol，2X 常溫保存
5g N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 Acetyl-D-Glucosamine ?20℃保存 0.078-5 EU/mL ELISA Kit for Human Calcitonin gene-related peptide 1
5 mg H-89 . 2HCL（PKA抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 78-5000 pg/mL 人α-烯醇化(Alpha-enolase)ELISA試劑盒
1瓶 U-2 OS-Luc teT-on株 U-2 OS-Luc teT-on 低溫運(yùn)輸和保存 0.625-40 ng/mL 人泛素蛋白連接E3成分N-識(shí)別蛋白4ELISA試劑盒
2 ug pET-33b(+) pET-33b(+) 低溫運(yùn)輸，-20℃保存乳糖肉湯 進(jìn)口、國產(chǎn)Lactose Broth用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)前增菌250
