細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局
保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔進(jìn)行消毒。
在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器;移液器置于右前方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸取;試管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放廢液。
培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作
Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞
英文名稱 | Ana1:Ana-1 | 貨號(hào) | A01X1029 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
分類 | 小鼠系 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
商品介紹:
別稱 | Ana-1 |
組織來源 | 巨噬細(xì)胞 |
生長(zhǎng)特性 | 半貼半懸 |
細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
保藏機(jī)構(gòu) | KCB; KCB 200784YJ |
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:
一、概念不同
1、細(xì)胞株:細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(Cell Strain)。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞系(cell line)指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。
二、形成方法不同
1、細(xì)胞株:通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機(jī),原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功成為細(xì)胞系。
三、細(xì)胞的延續(xù)性不同
1、細(xì)胞株:原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”,不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類:
化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。
生物污染物,如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。
可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。
交叉污染的確認(rèn)
為細(xì)胞換液時(shí),要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入,而不是直接加到細(xì)胞中,以免損傷細(xì)胞,當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時(shí)尤其需要注意。
使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時(shí),每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
細(xì)胞傳代的時(shí)間把握
當(dāng)細(xì)胞呈指數(shù)增殖,貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒有擴(kuò)增空間,或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞已超過培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力,無法進(jìn)一步生長(zhǎng)時(shí),細(xì)胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細(xì)胞密度維持在最佳水平,以便細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng),并且刺激進(jìn)一步增殖,必須對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代。
細(xì)胞培養(yǎng)的步驟:
細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備
細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。
這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì),或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。
變質(zhì)嚴(yán)重時(shí)將會(huì)成為不可逆的變化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
LH ELISA Kit 魚促黃體激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DAT1/FITC 熒光素標(biāo)記抗多巴胺相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CYP39A1 24α7羥化酶抗體 規(guī)格 0.2ml
Rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記大鼠IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml
lipocalin 1 英文名稱: 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh XTP4 乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-DAT1/FITC 熒光素標(biāo)記抗多巴胺相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Cx32/FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白32抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DCST1 DCST1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Goat IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記羊IgM 0.1ml
LIPK 英文名稱: 脂肪酶家庭成員K抗體 0.2ml
(2NP-SEM)西林酮代謝物單克隆抗體 小鼠單抗 0.025
Anti-Cx32/FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白32抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HA(Mouse Hyaluronic acid) ELISA Kit 小鼠透明質(zhì)酸Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-CRTAM/FITC 熒光素標(biāo)記CRTAM抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DECR1 線粒體2,4-雙烯酰還原酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rat IgG/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記大鼠IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml
Lipin 1 英文名稱: 0脂酸0酸酯酶LPIN1抗體 0.2ml
卡那單克隆抗體 小鼠單抗 1
Anti-CRTAM/FITC 熒光素標(biāo)記CRTAM抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANX- V (Mouse annexin V ) ELISA Kit 小鼠膜聯(lián)蛋白ⅤMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-c-fos/FITC 熒光素標(biāo)記即刻早期基因(原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DOK5/IRS6 胞漿接頭蛋白Dok5抗體 規(guī)格 0.2ml
名 價(jià) 格(RMB)
LIPG 英文名稱: 內(nèi)皮脂肪酶抗體 0.2ml
ACTG2 英文名稱: γ2肌動(dòng)蛋白抗體 0.2ml
Anti-c-fos/FITC 熒光素標(biāo)記即刻早期基因(原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
C-Peptide(Mouse C-Peptide)ELISA Kit 小鼠C肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞Anti-Cortactin/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠皮層肌動(dòng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DIS/CCAR1 細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit IgG/PE 熒光素PE標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml
LINGO4 英文名稱: 富含亮酸重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體 0.2ml
紅檢測(cè)試劑盒 96孔/盒 動(dòng)物組織/水產(chǎn)/蜂蜜/奶
Anti-Cortactin/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠皮層肌動(dòng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml