細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96863 |
商品介紹:
名稱 DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞) 別稱DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40 年齡(性別)1日齡 組織來源法氏囊,淋巴瘤 生長特性懸浮細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣 背景描述DT40細(xì)胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的細(xì)胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到,法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細(xì)胞。DT40細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,表達(dá)的c-myc RNA水平較高。DT40細(xì)胞缺少一個(gè)正常c-myc基因,但含有兩個(gè)拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。DT40細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點(diǎn),DT40包含一個(gè)重排和一個(gè)胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)胞中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC)Ⅱ類抗原表達(dá)。v-rel誘導(dǎo)的MHCⅡ表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快,且其有效性在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍。DT40細(xì)胞呈淋巴母細(xì)胞表型;傳染性檢測表明,DT40細(xì)胞釋放低水平的傳染性RAV-1,DT40細(xì)胞株可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM+0.05mM β-mercaptoethanol+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~48 hours 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
人 TIM1 / KIM1 / HAVCR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 EpCAM / TROP1 / CD326 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 SFTPD / SP-D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CDH16 / Cadherin-16 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 TrkA
DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)2 ug pGEX pGEX 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.78-50 mIU/mL 人血小板解整合素樣金屬蛋白20(ADAMTS20)ELISA試劑盒
含90ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質(zhì)袋 Buffered Peptone Water 90ml/袋*10
1瓶 CH3株 CH3 低溫運(yùn)輸和保存 1.56-100 ng/mL 人1-磷脂酰肌醇-4,5-二二酯β-1(PLCB1)ELISA試劑盒
1000次 改良Lowry法蛋白定量試劑盒 Enhanced Lowry Assay Kit 常溫保存,BSA標(biāo)準(zhǔn)需要-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Protein S100-A8
植物組織培養(yǎng)基
Preston肉湯添加劑 1ml*5 15.6-1000 U/mL ELISA Kit for Human Eosinophil peroxidase
2 ug pECFP-Peroxi pECFP-Peroxi 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250M Storage Buffer in TBS and Glycerol Storage Buffer in TBS and Glycerol 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human SUMO-activating enzyme subunit 1
2 ug psiCHECK-2 psiCHECK-2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Nucleoside diphosphate kinase A
2 ug pJG45 pJG45 低溫運(yùn)輸,-20℃保存mEC肉湯進(jìn)口、國產(chǎn)mE.Coli Broth250克用于大腸桿菌O157選擇性增菌
賴脫羧肉湯 20支 0.78-50 ng/mL 人B淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒