商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96873 |
商品介紹:
名稱 HULEC-5a (肺微血管內(nèi)皮細胞) (暫不供應(yīng)) 別稱HULEC-5a; HULEC-5A; Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a 年齡(性別)新生 組織來源肺 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基MCDB131+10ng/ml EGF+1μg/ml Hydrocortisone+10mM L-glutamine+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 IFNAR2 / IFNABR 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 IFNAR2 / IFNABR 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CEACAM8 / CD66b 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 EDAR
HULEC-5a (肺微血管內(nèi)皮細胞) 2 ug pSV2neo pSV2neo 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pDEST22 pDEST22 低溫運輸,-20℃保存脫氧膽酸鈉瓊脂進口、國產(chǎn)DCLA250克大腸菌群的平板測定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng)
1只 硅膠膜離心吸附柱(大提)收集管 進口、國產(chǎn)100克
2 ug pRetro-On pRetro-On 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
1 管 JM109(DE3)大腸桿菌 JM109(DE3) E.coli Strain -80℃保存 15.6-1000 pg/mL 漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
1 g Hemoglobin(NO清除劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人CD34分子(CD34)ELISA試劑盒
100支 1000 μL RNase-free 藍吸頭(盒裝已滅菌) 常溫 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human C4b-binding protein beta chain
2 ug pUB6/V5 His lacZ pUB6/V5 His lacZ 低溫運輸,-20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人醛脫氫家族16成員A1(ALDH16A1)ELISA試劑盒
100mL CHES Buffer,0.5M,pH9.5 CHES Buffer,0.5M,pH9.5 常溫保存 0.78-50 ng/mL 人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒
沙氏瓊脂培養(yǎng)基(SDA) Sabourauds Agar 250g 0.312-20 ng/mL 人鐵鉬輔因子硫化(MCS)ELISA試劑盒
1mL 纖連蛋白 ( 人血 ) Fibronectin(FN) From Human Plasma -20℃保存SOB肉湯進口、國產(chǎn)SOB Broth250克BR
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。