參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：庚型肝炎病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：YS-P013375
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
小鼠彈性蛋白(ELN)乙酸膽固酯(>96%,BR)間粘附分子-1抗體
小鼠彈性蛋白微纖維界面蛋白1(EMILIN1)硬脂酸膽固酯(>98%,BR)間粘附分子1抗體
小鼠延伸蛋白A(ELOA)重膽堿(>98%,BR)間粘附分子-1抗體
小鼠胚外胚層發(fā)育蛋白(EED)鉻粒(>99%，BR)間粘附分子-1抗體
小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)鉻粉(>99%，BR)間粘附分子-1抗體
小鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號1(ERN1)氯化鉻六水(>98%,BR)親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIF抗體
小鼠內(nèi)皮抑素(ES)硫酸鉻十二水過氧化氫酶抗體
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)硫酸鉻(>98%,BR)內(nèi)氯離子通道蛋白4抗體
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(NOS3/eNOS)三氧化鉻(>99%，BR)生長調(diào)控蛋白19/環(huán)指蛋白197抗體
小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)酸性紅B卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體
小鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)直接黃12染色體修飾蛋白1抗體（金屬蛋白酶1）
小鼠內(nèi)皮素受體A(ETRA)肉桂酰(>98%，BR)鈣依賴分泌激活蛋白1抗體
小鼠接頭蛋白2(ELMO2)肉桂油小腦肽1抗體
小鼠嗜酸性粒相關(guān)核糖核酸酶家族成員14(Ear 14) 檸檬(>95%,Pract Grade)小腦肽2抗體
小鼠嗜酸性粒趨化因子受體(ECFR)檸酸(>98%,BR)小腦肽4抗體
小鼠嗜酸粒趨化因子(ECF/CCL11)2-氯-4--a-L-巖糖苷(>98%,BR)腦海綿狀血管畸形蛋白2抗體
庚型肝炎病毒PCR試劑盒GRM5/mGluR5 促代謝型谷氨酸受體5抗體三氯化 AR,97.0%
GRM2+GRM4 促代謝型谷氨酸受體2+4抗體堿式碳酸鉛 AR,99.0%
GRO Alpha/GRO-1 生長調(diào)節(jié)致癌基因-1抗體堿式碳酸鉛 ACS
MIP2/GRO Beta/CXCL2 巨噬炎癥蛋白2（ GRＯβ）抗體發(fā)煙硝酸 AR
GRO gamma/CXCL3 生長調(diào)節(jié)致癌基因gamma（GRＯγ）抗體間酚 IND
CXCL4/PF-4 血小板因子4抗體鹽酸萘乙二 AR，98%
CXCL5 上皮中性?；罨?8抗體黑色素(溶） Biological stain
GRP 促胃泌素釋放肽抗體鹽酸萘乙二 ACS, >98%
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
