填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次說(shuō)明書使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過(guò)第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次說(shuō)明書詳細(xì)說(shuō)明書:
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次說(shuō)明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針?lè)肿拥奈稽c(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次說(shuō)明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過(guò)程中,一定不要使印跡。
大鼠胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人新喋呤(NEOP)免疫試劑盒 Human neopterin,NEOP ELISA kit
胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmajorbasicprotein,MBPELISA試劑盒大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISA試劑盒人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanleukoregulin,LRELISAKit人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)ELISA試劑盒 ,英文名: p-NF-κB ELISA Kit
人血小板活化因子(PAF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanplaetactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T
鯊魚*(Cortisol)免疫試劑盒 Shark Cortisol ELISA Kit
CLIAKitforOVAsIgE(HumanovalbuminspecificIgE)ELISAKit人卵清蛋白特異性IgE規(guī)格:48T/96T
臺(tái)桌清潔劑(飯桌、工作臺(tái)、學(xué)生課桌椅等)500毫升/瓶
ELISAKitIL-1α人白介素1α規(guī)格:48T/96T
小鼠*A(CsA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat phosphorylated extracellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒
humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-myelinantibodyIgA,AMAIgAELISA試劑盒人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物醛同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanuridinedipho-sphateglucuronosyltransferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-Arachidonoyl Glycerol-d5 (1 mg) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 1-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 1-AG-d5; 1-Arachidonoyl Glycerol-d5
S-(4-nitnobenzyl)-6-thioinosine (50 mg) NBMPR|NBTI|NSC 296962; S-4-nitnopxenylmetxyl-6-thioinosine
APC-iFluor 750-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml APC-iFluor 750-streptavidin conjugate 1 mg/ml
N-acetyl-3,4-metxylenedioxymetxcathinone (50 mg) N-
Linoleic Acid (peroxide free) (500 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid (peroxide free)
1-N-[2-(1H-indol-3-yl)etxyl]-4-N-pyridin-4-ylbenzene-1,4-diamine; Serdemetan JNJ-26854165
GLP-2 (1-34) (human)His-Ala-Asp-Gly-Ser-Phe-Ser-Asp-Glu-Met-Asn-Thr-Ile-Leu-Asp-Asn-Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Asn-Trp-Leu-Ile-Gln-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Arg
Xenopsin (XP)Pyr-Gly-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu
[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (porcine)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Leu-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2
Biotin-Amyloid β-Protein (1-40)Biotin-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val
Orexin B, humanArg-Ser-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Ala-Ser-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次說(shuō)明書1,1,2-三錄乙烷1,1,2-TrichloroethaneCP500mL
CA1311-5g3-安基-1,2,4-三唑(3-AT)61-82-55g0
ER0582?Nde I
PolyGel DNA Extraction Kit100T
Iodoacetic Acid, wo7ium Salt100g