微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL說明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL說明書使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進(jìn)行。
微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL說明書詳細(xì)說明書:
微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL說明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit
人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫試劑盒 Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,sIL-1RⅡ ELISA kit
CLIAKitforTdT(Humanterminaldeoxynucleotidyltransferase)ELISAKit人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶規(guī)格:48T/96T
人體HemoglobinERFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKitanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗體規(guī)格:48T/96T
大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試劑盒 Human ANGPTL3 ELISA Kit
人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒 ,英文名: LKM ELISA Kit
RatInterleukin1α,IL-1αELISA試劑盒大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlucosedependentinsulinreleasingpolypeptide,GIPELISA試劑盒人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin9,IL-9ELISAKit人白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat endothelial nitric oxide synthase (eNOS) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
Human2,3-dinorthromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanapoproteinB100,apo-B100ELISA試劑盒人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葉綠體總蛋白定量檢測試劑盒20次
HumanTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(S)-HODE-biotin (500 ug) 13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadiene-(2-biotinyl)hydrazide; 13(S)-HODE-biotin
RHC-80267 (25 mg) U-57908; 1,1’-[O,O’-[1,6-hexanediylbis(iminocarbonyl)]dioxime]
鬼筆環(huán)肽-iFluor 405偶聯(lián)物 Phalloidin-iFluor 405 Conjugate
4-xy7noxyamphetamine (xy7nochloride) (10 mg) 4-
Oleic Acid (1 g) 9Z-Octadecenoic acid; Oleic Acid
9H-Inde,2-e][1,2,5]oxadiazolo[3,4-b]pyrazin-9-one SMER-3
HCV Core Protein (59-68)Arg-Gly-Arg-Arg-Gln-Pro-Ile-Pro-Lys-Ala
β-Amyloid (10-20)Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe
[Pyr16]-VIP (16-28) (chicken)Pyr-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Val-Leu-Thr-NH2
BombesinPyr-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2
PAR-1-selective peptideThr-Phe-Leu-Leu-Arg-Asn
微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL說明書三甘醇Trietxylene glycolCP500mL
SH65000透析袋夾子 6cm6cm0
A7413-5GAlloxan 四氧嘧啶2244-11-35g
Pfu DNA聚合酶250U
L-Leucine100g