MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書
儲(chǔ)存條件： 2-8℃避光保存。*不用的分裝后于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡介：
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-（4，5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧甲酯基）-2-（4-磺苯基）-2H-四唑（金翁），內(nèi)鹽；MTS]快速高靈敏度檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。MTS被細(xì)胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物，新陳代謝活躍的活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶類將MTS轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物，這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量，而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細(xì)胞的數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
鹽膚木Rhus chinensis Rhuscholide A 鹽膚木內(nèi)酯 A 944804-58-4 C31H42O3 ≥95%
雪膽速HqmslqcincHPLC≥98%;20mg/支
10-脫乙?；涂ǘ?/span>III Deacetylbaccatin III 32981-86-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對(duì)照藥材板栗殼121475-200401TLC法鑒別
Ginkgolic Acids
144-83-2 磺胺比啶標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
光萼野柏合減(光萼豬屎豆減;屋沙拉明)Lightcalyxmonocrotaline(usaramine;usaramine)12203-87-4HPLC≥98%,20mg/支;
Heteronoside HETERONOSIDE 852638-61-0
Cefprozil (E)-Isomer*(E)-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品92676-86-350mg*(E)-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品
蝙蝠葛堿;Dauricine 524-17-4 20mg 訂購|咨詢
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin O 黃花香茶菜素 O 1169806-00-1 C28H40O4 ≥95%
原人參二醇ProtopcncxcdiolHPLC≥98%;20mg/支
川續(xù)斷皂苷乙 Dipsacoside B 33289-85-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對(duì)照藥材白土苓(短柱肖菝葜)121537-200501TLC法鑒別
ISOFORSKOLIN 異佛斯可林純度：>95%
溴酚藍(lán)100克
556-03-6DL-酪酸;DL-β-對(duì)羥基本基丙酸;DL-本酚基丙酸;DL-β-對(duì)羥基本基-α-基丙酸;DL-干酪基酸DL-Tyrosine;DL-α-AMino-β-p-xy7noxypxenylpropionic acid;DL-α-AMino-p-xy7noxyxy7nocinnaMic acid;(±)-2-AMino-3-(4-xy7noxypxenyl)propionic acid;3-(4-xy7noxypxenyl)-DL-alanine
BRIJ98,20%SOLUTIONBRIJ 98, 20% 溶液0100MLRT
N4-乙酰胞嘧啶 N4-Acetylcytosine,99% 14631-20-0 5G 通用試劑
AMV反轉(zhuǎn)錄酶/AMV逆轉(zhuǎn)錄酶/AMV Reverse transcriptase BR，10u/ul， 200u 進(jìn)分
3-嗎啉-2-羥基丙磺酸鈉，英文名或英文縮寫：MOPSO wo7ium salt，級(jí)別：質(zhì)譜級(jí)，規(guī)格：100克
硅同 SF-96 Siliconq SF 96
2,7-Dixy7noxyfluorene 5043-54-9
水楊酰苯胺 Salicylanilide,98% 87-17-2 25G 通用試劑
DL3000 DNA Marker 片段：100、250、500、750、1000、1500、2000、2500、3000bp 50次/300ul/支 國產(chǎn)/進(jìn)口
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書BOC-甘酸shēng huà shì jì容量：100克
529-28-2鄰本甲醚2-Iodoanisole
3-Chloro-thiopxene-2-carboxylic acid amide 147123-68-0
乙基三苯基溴化膦 Ethyltriphenylphosphonium bromide,99% 1530-32-1 25G 表面活性劑
DABSUBSTRATETAETS3.3'-二基聯(lián)本胺 生物技術(shù)級(jí)白色紫色斑點(diǎn)至淺薰衣草色FROZENsigma
