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血管通透性測試染色試劑盒100ml使用說明書

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  • 所在地上海市
  • 更新時間2017-07-06
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9968
  • 人氣值79373
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血管通透性測試染色試劑盒100ml

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血管通透性測試染色試劑盒100ml使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
血管通透性測試染色試劑盒100ml使用說明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CM-H001人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

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SW620細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HSC1細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0905

人胚胎,皮膚,肌肉;M-7

ASGR1 Others Mouse 小鼠 ASGPR1 / ASGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠紅白血病細(xì)胞;MEL

IGSF11 Others Human IGSF11 / BTIGSF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MDA-MB-231 人癌細(xì)胞

SK-BR-3人腺癌細(xì)胞 SK-BR-3 human breast adenocarcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白

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人成纖維細(xì)胞;HFF

F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells

NW38細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 鼠李糖乳桿菌 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251

ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒 Human VCAM-1 ELISA kit

人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PM-Scl/PM-1 ELISA Kit

RatInterleukin3,IL-3ELISA試劑盒大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

humanglutamicaciddecarboxylaseautoantibody,GAD-AbELISA試劑盒人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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Humanplaetfactor3,PF3ELISAKit 人*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

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兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/RLA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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