MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件： 2-8℃避光保存。*不用的分裝后于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-（4，5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧甲酯基）-2-（4-磺苯基）-2H-四唑（金翁），內(nèi)鹽；MTS]快速高靈敏度檢測(cè)細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測(cè)產(chǎn)品。MTS被細(xì)胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物，新陳代謝活躍的活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶類(lèi)將MTS轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物，這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測(cè)量，而不需要另外作處理。由490nm測(cè)量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細(xì)胞的數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線(xiàn)性關(guān)系。
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
我司MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶(hù)提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式！我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢(xún)！
黃杜鵑RhododendronmolleG.Don Rhodojaponin III 鬧羊花素III 26342-66-5 C20H32O6 ≥98%
蔓荊子皇速VitqxtrifolicHucngSuHPLC≥98%;20mg/支
澳洲茄邊減;奧洲邊茄減 Solamargine 20318-30-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材金果欖121474-200401TLC法鑒別
(C13:0,C15:1,C17:1)總銀杏酸(C13:0,C15:1,C17:1)純度：≥95%
144-80-9 *標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
羅漢果皇速Momordicagrosvenoriflavin126980-60-810mg/支;HPLC≥98%
25-xy7noxycycloart-23-en-3-one 25-輕基環(huán)木菠蘿-23-烯-3-同 148044-47-7
常山酮乳酸鹽 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：82186-71-8 1ml
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扇開(kāi)狗牙花Ervatamia flabelliformis 19,20-(E)-Vallesamine 19,20-(E)-瓦來(lái)薩明堿 3368-87-4 C20H24N2O3 ≥96%
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青蒿甲素;青高素A; 黃花高素 A artenuin A 207446-92-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定福辛普利拉100951-200801常溫，避光50mg
白術(shù)內(nèi)酯II;蒼術(shù)內(nèi)酯II Atractylenolide II 73069-14-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
溴化鎘，英文名或英文縮寫(xiě)：Cadmium bromide，級(jí)別：2N，200目，規(guī)格：1克
(b-環(huán)狀糊精)
URICACID尿酸試劑級(jí)25G69-93-2RT
兩性電解質(zhì) cMPHOLYTq CcRRIqR, PH 5.0-7.0
Malonamide丙二酰胺1克超純，99%
3-嶙酸甘油脫氫酶-嶙酸丙糖異構(gòu)酶，英文名或英文縮寫(xiě)：GDH-TPI，級(jí)別：生物技術(shù)級(jí)，98%，規(guī)格：100克
13126-12-0銣RubidiuM nitnate
pxenOLRED酚紅ACS級(jí)亮紅色粉末RTsigma
磷酸鈉十二水 Sodium phosphate tribasic dodecahydrat... 10101-89-0 100G 通用試劑
反式-1,2-環(huán)己二胺 trans-1,2-Cyclohexanediamine,99% 1121-22-8 10ML 通用試劑
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法人型支原體快速培養(yǎng)基支RT
14459-95-1亞鐵potewwium ferrocyanide trihyrate
二正辛胺1公斤
乙基叔丁基醚 tert-Butyl ethyl ,99% 637-92-3 10G 通用試劑
偶氮胂Ⅰ/鄰苯胂酸偶氮-1,8-二羥基-3,6-二磺酸鈉/2-(鄰胂酸偶氮苯)-1,8-二羥基-3,6-二磺酸鈉/鈾試劑/新釷試劑/偶胂偶氮/Arsenazo I AR，80% 5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
