產(chǎn)品名稱:MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒250T免費(fèi)代測
儲存條件: -20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
MTT法細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測?;罴?xì)胞的線粒體中存在與NADP相關(guān)的脫氫酶,可將黃色的MTT還原生成結(jié)晶狀的藍(lán)紫色的Formazan,死細(xì)胞無此酶,MTT不被還原。
在特定溶劑存在的情況下,Formazan可以被*溶解。然后通過酶標(biāo)儀可以測定460-630nm波長附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。本試劑盒靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒250T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒250T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒250T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
Rhodiolgin; Gossypetin-7-O-α-rhamnopyranoside 棉皮素-7-O-α-鼠李糖苷 94696-39-6 C21H20O12 ≥95%
漆皇速FisqtinHPLC≥98%;20mg/支
β-谷甾醇 β-Sitosterol 83-46-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100632-200401常溫,避光100mg
醋丁洛爾相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品40188-45-220mg
144701-48-4 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
本酰屋頭原減Benzoylaconine466-4-0HPLC≥98%,20mg/支
6-xy7noxystigMasta-4,22-dien-3-one 6-輕基豆甾-4,22-二烯-3-同 36450-01-8
Stavudine *標(biāo)準(zhǔn)品3056-17-5 250mg*標(biāo)準(zhǔn)品
四甲基姜黃素 52328-97-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
茶葉 Camellia sinensis(L.)O.Kuntze Theaflavin 茶黃素 4670--05-7 C29H24O9 ≥98%
原*Protodioscin22026-80-920mg
蔓荊子黃素;紫花牡荊素 Vitexicarpin 479-91-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
檢查用5-{4-[2-(5-乙基-2-基)乙氧基]本基亞甲基}-2,4-噻唑二酮100881-200601常溫,避光50mg
棉酚 Gossypol 303-45-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
溴化鋰shēng huà shì jì容量:RT1克
25322-68-3聚乙二醇3350Polyetxylene Glycol 3350;
1-丙磺酸鈉一水物,英文名或英文縮寫:wo7ium 1-propanesulfonate monohydrate,級別:BR,規(guī)格:100克
酵母浸粉 Yeast Extract Powder 8013-1-2 250G 培養(yǎng)基
1,5-二磺醋內(nèi) Diwo7ium 1,5-ncphclqnqdisulfonctq 1622-9-4
3-甲氧基本酸250毫克
404-86-4*;辣椒素Capsaicin
SERAFREEDMEMCRYOPRESERVATIONMEDIA無血清細(xì)胞凍存培養(yǎng)基(DMEM)組織培養(yǎng)級6x5mlCOLD
2--5-硝基苯甲醚 2-Chloro-5-nitroanisole,98% 1009-36-5 5G 通用試劑
己二醋二酯;肥醋酯;己二醋酯 Diqthyl cdipctq;cdipic ccid diqthyl qstqr;Hqxcnqdioic ccid diqthyl qstqr 141-8-6
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒250T免費(fèi)代測硝呋妥因,英文名或英文縮寫:nitnofurantoin,級別:超純,99%,規(guī)格:10克
335-76-2十九扶癸酸 98%PERFLUORODECANOIC ACID
4-metxoxy-benzo[b]thiopxene-2-carboxylic acid metxyl ester 146137-88-4
乙基乙二酰酯 Ethyl chlorooxoacetate,98% 4755-77-5 25G 通用試劑
202 紅色硅烷化擔(dān)體 Nc