公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實驗條件,*的設(shè)備,高素質(zhì)的實驗人員,保證您DNA 去磷酸化試劑盒20 次??品牌的實驗得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務(wù),您可以全稱參與了解實驗進程。
DNA 去磷酸化試劑盒20 次??品牌的詳細介紹:
服務(wù)流程
1)客戶提供材料
2)提取基因組RNA/DNA并確定其品質(zhì)
客戶提供
●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細胞、細菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存一年血液樣品(EDTA,肝素,檸檬酸鈉抗凝)
●詳細的背景資料:來源、特點、類型等
我們提供
基因組RNA/DNA提取、實驗報告
質(zhì)量保證
高純度RNA/DNA、完整性
貨期
3-5個工作日
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上。
1479純度:99%
試劑名稱:N,N-二乙基對苯二胺
NO.:93-05-0
分子式:C10H16N2
分子量:164.25
英文名稱:N,N-Diethyl-1,4-phenylenediamine
1443純度:98%
試劑名稱:L-*叔丁酯鹽酸鹽
NO.:13211-31-9
分子式:C9H19NO2.HCl
分子量:209.7136
英文名稱:L-Valine tert-butyl ester hydrochloride
9700純度:99%
試劑名稱:丙酮醛
NO.:78-98-8
分子式:C3H4O2
分子量:72.06
英文名稱:Methylglyoxal
1105純度:32%
dInsulin-like growth factor I receptor; JTK13; JTK13; MGC142170; MGC142172; MGC18216.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 免疫學 發(fā)育生物學 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長因子和激素
蛋白分子量 predicted molecular weight: 71/80kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human IGF1R around the phosphorylation site of Tyr1161
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000