注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:即用型易錯(cuò)PCR試劑盒
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號(hào):CP100396
產(chǎn)品規(guī)格:100次
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
抑肽酶 Aprotinin mg/mg5-Aminoindazole1933515-氨基吲唑
脂肪酶 Lipase 5g4-Aminohippuric acid6184-氨基馬尿酸
0.1 ml EU材質(zhì)薄壁八聯(lián)管1條/包3-Amino-phenylpropionic acid6149C9H11NO2
0.1 ml薄壁半裙邊96孔板(適用roche機(jī)器)塊/盒 6-Aminopenicillanic acid55166-氨基青霉烷酸
0.1ml 96孔PCR板 no skirted,flat rim(Eppendorf,MJ Research,MX000,StepOne plus)4-Amino-N-methylphthalimide24-氨基-N-
植物血凝素(PHA)ELISAKit Trenbolone cyclohexylmethylcarbonate 中文名:群勃龍環(huán)己碳酸酯 分子式:C26H34O4 度:98.0%
植物血凝素 5mg Trenbolone heptanoate 中文名: 分子式:C25H34O3 度:98.0%
植物血凝素 5mg Trenbolone heptanoate N 中文名: 分子式:C25H34O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
植物硝態(tài)氮測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Triamcinolone acetonide 中文名:曲安奈德 分子式:C24H31FO6 度:98.0%
植物纖維素酶(CE)ELISA試劑盒 Trenbolone 10161-33-8 中文名:群勃龍 分子式:C18H22O2
即用型易錯(cuò)PCR試劑盒胡椒堿 HPLC≥99% 20mg 超氧化物歧化酶(SOD)組織裂解樣品制備試劑盒50
胡蘿卜苷 HPLC≥98% 20mg Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胡麻屬苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員4(TNFRSF4)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFRSF4 ELISA Kit
胡桃醌 HPLC≥98% 20mg 犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測(cè)試劑盒Canineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T
湖貝甲素 HPLC≥95% 20mg 犬視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒 Canine Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit
葫蘆巴堿 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanLaminaPropriaLymphocyteELISAKit人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葫蘆巴堿鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg 超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液1毫升/500毫摩爾
葫蘆素B HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葫蘆素D HPLC≥98% 10mg 小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員10A(TNFRSF10A)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFRSF10A ELISA Kit
葫蘆素E HPLC≥95% 20mg 犬前列腺特異性抗原(PSA)ELISA檢測(cè)試劑盒Canineprostatespecificaigen,PSAELISAKit 96T/48T
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。