細(xì)胞名稱 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;IMR-32操作步驟
形態(tài)特性 存在兩種細(xì)胞類型,小的神經(jīng)母細(xì)胞樣細(xì)胞和大的透明成纖維樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是1967年4月由Nichols WW, Lee J和Dwight S建立,來(lái)源于一名13月齡白人男嬰腹部腫塊,臨床診斷為神經(jīng)母細(xì)胞瘤,伴有極少部位的類器官樣分化。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在0.4~4×105 cells/cm2之間,1:3~1:6傳代,2~3天換液1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:9;D16S539:8;D18S51:12,15;D19S433:14,15;D21S11:30,31;D2S1338:23,24;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:9,10;D8S1179:13;FGA:21,24;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:15;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;IMR-32操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;IMR-32操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)ELISA試劑盒 ,英文名: GGT ELISA Kit
γ-谷氨酰環(huán)化轉(zhuǎn)移酶(GGCT)ELISA試劑盒 ,英文名: GGCT ELISA Kit
γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA試劑盒 ,英文名: γ-ECS ELISA Kit
γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)ELISA試劑盒 ,英文名: γ-GCS ELISA Kit
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 ,英文名: IFI16/p16 ELISA Kit
γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒 ,英文名: MIGF/CXCL9 ELISA Kit
γ干擾素受體(IFN-γR)ELISA試劑盒 ,英文名: IFN-γR ELISA Kit
γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFN-γ ELISA Kit
γ干擾素(IFNγ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit
γ分泌素激活蛋白(PION)ELISA試劑盒 ,英文名: PION ELISA Kit
γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒 ,英文名: GABA ELISA Kit
β-轉(zhuǎn)導(dǎo)素重復(fù)序列包含蛋白(BTRC)ELISA試劑盒 ,英文名: BTRC ELISA Kit
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒 Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA kit
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒 Guinea pig monocyte chemotactic protein 1,MCP1 ELISA Kit
豚鼠單胺氧化酶(MAO)免疫試劑盒 Guinea pig monoamine oxidase,MAO ELISA Kit
豚鼠催產(chǎn)素(OT)免疫試劑盒 Guinea Pig Oxytocin,OT ELISA Kit
豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)免疫試劑盒 Guinea Pig adrenocorticotropic hormone,ACTH ELISA kit
豚鼠促卵泡素(FSH)免疫試劑盒 guinea pig follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
豚鼠雌激素(estrogen)免疫試劑盒 Guinea pig estrogen Elisa kit
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒 guinea pig intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;IMR-32操作步驟豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒 Guinea pig Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit
豚鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒 Guinea pig leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit
豚鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒 guinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit
豚鼠白介素8(IL-8)免疫試劑盒 Guinea pig Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit
豚鼠白介素6(IL-6)免疫試劑盒 guinea pig Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit