細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一染色體畸變男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 47, XXY
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
端粒保護蛋白1(POT1)ELISA試劑盒 ,英文名: POT1 ELISA Kit
蛋白S(Protein S)ELISA試劑盒 ,英文名: Protein S ELISA Kit
蛋白C(ProteinC)ELISA試劑盒 ,英文名: ProteinC ELISA Kit
蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒 ,英文名: Protein C ELISA Kit
蛋白C(PC)ELISA試劑盒 ,英文名: PC ELISA Kit
蛋白ATP1B4(ATP1B4)ELISA試劑盒 ,英文名: ATP1B4 ELISA Kit
蛋白(肽酰脯氨酰順/反異構(gòu)酶)NIMA結(jié)合1(PIN1)ELISA試劑盒 ,英文名: PIN1 ELISA Kit
蛋白 DJ-1(PARK7)ELISA試劑盒 ,英文名: PARK7 ELISA Kit
彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒 ,英文名: Elastase ELISA Kit
彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒 ,英文名: ELN ELISA Kit
膽酸(Cholic acid)ELISA試劑盒 ,英文名: Cholic acid ELISA Kit
膽酸(CA)ELISA試劑盒 ,英文名: CA ELISA Kit
小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒 Mouse heat shock protein 27,HSP-27 ELISA Kit
小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒 Mouse glutamic acid decarboxylase autoantibody IgG,GAD-Ab-IgG ELISA Kit
小鼠成纖維細胞生長因子10(FGF10)免疫試劑盒 Mouse fibroblast growth factor 10,FGF10 ELISA Kit
小鼠成神經(jīng)細胞瘤RAS 病毒(v-ras)癌基因同源物免疫試劑盒 Mouse GTPase NRas(NRAS)ELISA kit
小鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)免疫試劑盒 Mouse cytosolic phospholipase A2,cPLA2 ELISA Kit
小鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)免疫試劑盒 Mouse Bladder tumor antigen,BTA ELISA Kit
小鼠半乳糖凝集素-3(Gal-3)免疫試劑盒 Mouse Galectin 3,GAL-3 ELISA Kit
小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)免疫試劑盒 Mouse galactose-6-sulphate sulphatase,Gal-6S ELISA Kit
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)免疫試劑盒 Mouse Cystatin C,Cys-C ELISA Kit
小鼠百日咳病毒IgG抗體免疫試劑盒 Mouse bordela pertussis IgG antibody ELISA Kit
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29操作步驟小鼠百白破抗體免疫試劑盒 Mouse DPT antibody ELISA Kit
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒 Mouse leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit
小鼠白血病抑制因子(LIF)免疫試劑盒 Mouse Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit