細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906運(yùn)輸
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906運(yùn)輸冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906運(yùn)輸操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906運(yùn)輸注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
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小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
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小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL成人表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
試劑耗材 T-47D(人管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
*(含10mL 酶解緩沖液) 1mL小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7
小葉白蠟樹 Fraxinus brngeana DC Fraxetin 秦皮素 574-84-5 C10H8O5 ≥98%11021-13-9 人參皂苷Rb2 ginsenoside rb2 1079.27 C53H90O22
臭牡丹Clerodendrum colebrookianum Isothymusin 5,8-二羥基-2-(4-羥基苯基)-6,7-二甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮 98755-25-0 C17H14O7 ≥98.5%非洲沃坎加樹 Voacango Africana Stapf種子 Tabersonine 它勃寧 4429-63-4 C21H24N2O2 ≥98%
山柰酚-3-O-蕓香糖苷;酚-3-O-蕓香糖苷 4H-1-Benzopyran-4-one,3-[[6-O-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-b-D-glucopyranosyl]oxy]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)- 17650-84-9 C27H30O15白樺脂醛 Betulinicaldehyde 13159-28-9 440.70092 C30H48O2
中華粗榧Cephalotaxus sinensis 7-O-Methylporiol 5,4'-二羥基-6-甲基-7-甲氧基黃烷酮 206560-99-8 C17H16O5 ≥95%cinnamaldehyde 肉桂醛 104-55-2 132.16 C9H8O
刺桐Erythrina arborescens Phaseollidin 菜豆素 37831-70-2 C20H20O4 ≥99%構(gòu)棘Cudrania cochinchinensis 6,8-Diprenylorobol 6,8-二異戊烯基香豌豆苷元 66777-70-6 C25H26O6 ≥98%
* (-)-Huperzine A 102518-79-6 242.32 C15H18N2O蔓荊Vitex trifolia Vitexilactone 牡荊內(nèi)酯 61263-49-8 C22H34O5 ≥95%
云南紅豆杉Taxus yunnanensis Dihydroconiferyl alcohol 二氫松柏醇 2305-13-7 C10H14O3 ≥95%小蕓木Micromelum sp. 1,3-Dihydroxy-4-methoxy- 10-methylacridin-9(10H)-one 1,3-二羥基-4-甲氧基-10-甲基吖啶-9(10H)-酮 1189362-86-4 C15H13NO4 ≥95%
10376-48-4 紫菀酮 Shionone 426.7174 C30H50O大葉仙茅Curculigo capitulata 2,6-Dimethoxybenzoic acid 2,6-二甲氧基苯甲酸 1466-76-8 C9H10O4 ≥90%
4773-96-0 芒果苷 mangiferin from mangifera indica leaves 422.33962 C19H18O11波羅蜜Artocarpus heterophyllus Artoheterophyllin B 1174017-37-8 C30H32O7 ≥95%
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906運(yùn)輸28831-65-4 紫草酸 Lithospermic acid 538.46 C27H22O1218797-80-3 乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇醇靈堿 [1,3]Benzodioxolo[5,6-c]-1,3-dioxolo[4,5-i]phenanthridin-6-ol,5b,6,7,12b,13,14-hexahydro-5b,13-dimethyl-, 6-acetate, (5bR,6S,12bR)- C23H23NO6
臭椿Ailanthus altissima Ocotillone (24S)-20,24-環(huán)氧-25-羥基達(dá)瑪樹脂-3-酮 22549-21-9 C30H50O3 ≥97%beta-D-fructopyranose 果糖 7660-25-5 180.15588 C6H12O6
Sclareol 香紫蘇醇 515-03-7 308.5 C20H36O297-59-6 * Allantoin 158.12 C4H6N4O3
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