中文名稱 3-磷酸甘油醛脫氫酶(兔來(lái)源免疫組化用抗體)
英文名稱 Anti-GAPDH
濃 度: 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from the middle of human GAPDH
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
別 名 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
貨號(hào) | YSRIBIO-018463 |
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳suan氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨suan的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
D-葡萄糖內(nèi)酯 99%轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β檢測(cè)試劑盒
蒿甲 98%轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1檢測(cè)試劑盒
鹽辛可寧 99%轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2檢測(cè)試劑盒
鹽賽庚啶 98%轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3檢測(cè)試劑盒
辛可寧 98%轉(zhuǎn)錄因子檢測(cè)試劑盒
辛可尼定 98%轉(zhuǎn)鐵蛋白檢測(cè)試劑盒
一鹽奎寧 99%轉(zhuǎn)鐵蛋白受體檢測(cè)試劑盒
一鹽奎寧 99%,用于熒光分析轉(zhuǎn)移因子檢測(cè)試劑盒
奎尼丁 98%總β淀粉樣蛋白檢測(cè)試劑盒
硫奎寧 98%總膽固檢測(cè)試劑盒
硫奎寧 生物試劑級(jí),99.0%,熒光分析總膽紅檢測(cè)試劑盒
蛇根 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%總膽汁檢測(cè)試劑盒
≥99.0% (HPLC)總蛋白檢測(cè)試劑盒
用于LC-MS,>99.9%(HPLC)總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒
間甲苯甲 CP總鐵結(jié)合力檢測(cè)試劑盒
Anti-GAPDH抗體Anti-GLUT1/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgG
Anti-GLUT2/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體IgG
Anti-GLUT3/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體IgG
Anti-GLUT4/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體IgG
Anti-GLUT12/slc2a12/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12抗體IgG
Anti-Glycoprotein /FITC 熒光標(biāo)記風(fēng)疹病糖蛋白抗體IgG
Anti-glypican 1/FITC 熒光標(biāo)記磷脂酰