中文名稱 表皮生長(zhǎng)因子抗體
英文名稱 Anti-EGF
濃 度: 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和激素 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 5.8/133kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from hu EGF
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:20-100 IF=1:50-200 IEM=1:20-200 IGS=1:20-200 GICA=1:20-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
別 名 Beta urogastrone; EGF; Egf; EGF_HUMAN; Epidermal Growth Factor; Epidermal Growth Factor; HOMG4; OTTHUMP00000219721; OTTHUMP00000219722; Pro epidermal growth factor; URG; Urogastrone.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
貨號(hào) | YSRIBIO-018379 |
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳suan氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨suan的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
溴代異戊烷 96%BH3相互作用域死亡激動(dòng)劑(Bid)ELISA試劑盒色C氧化檢測(cè)試劑盒
溴乙甲酯 97%Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)ELISA試劑盒F-ATPase檢測(cè)試劑盒
溴烷 >99.0%(GC)Bcl2相關(guān)髓白血病序列1(MCL1)ELISA試劑盒色P450單加氧檢測(cè)試劑盒
溴代炔 99%Bcl2拮抗/殺傷因子1(BAK1)ELISA試劑盒腺三磷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白檢測(cè)試劑盒
1,1,2,2-四溴乙烷 98%Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)ELISA試劑盒UDP葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移檢測(cè)試劑盒
1,2,3-三溴烷 97%Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒酯化檢測(cè)試劑盒
3-乙酰吡啶 98%Battenin蛋白(BTS)ELISA試劑盒酪蛋白檢測(cè)試劑盒
2-氨基苯甲酰 98%Bassoon蛋白(BSN)ELISA試劑盒大豆球蛋白檢測(cè)試劑盒
2-氨基-4-甲基吡啶 97%Axotrophin蛋白(AXOT)ELISA試劑盒β-伴大豆球蛋白檢測(cè)試劑盒
4-(氨基)吡啶 98%Axis抑制蛋白2(AXIN2)ELISA試劑盒八氫番茄紅檢測(cè)試劑盒
烯基基硅烷 98%Attractin蛋白(ATRN)ELISA試劑盒還原型輔II檢測(cè)試劑盒
烯基溴化鎂 1.0 M乙溶液Atrophin1蛋白(ATN1)ELISA試劑盒血栓前體蛋白檢測(cè)試劑盒
茴香二甲基縮 97%ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒二氧化檢測(cè)試劑盒
2-氨基-3-吡啶甲 97%ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G1(ABCG1)ELISA試劑盒多氧化檢測(cè)試劑盒
2-乙?;?6-溴吡啶 97%ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A4(ABCA4)ELISA試劑盒幾丁質(zhì)脫乙酰檢測(cè)試劑盒
Anti-EGF抗體Anti-cofilin/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠絲切蛋白抗體IgG
Anti-Phospho-Cofilin (Ser3) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化絲切蛋白抗體IgG
Anti-Cortactin/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠皮層肌動(dòng)蛋白抗體IgG
Anti-Cortactin (phospho Tyr466) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化皮層肌動(dòng)蛋白抗體IgG
Anti-COLEC12/CL-P1/FITC 熒光標(biāo)記凝集胎盤蛋白1抗體IgG
Ant