特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
海藻糖合成酶(TS)測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | BJ-01611228-1 |
商品介紹:
測(cè)定意義: 海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對(duì)生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。 測(cè)定原理: TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測(cè)定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。 需自備的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
磷酸化蛋白激酶MST1抗體羊泰勒蟲(張家川株-2)肝片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
多藥耐藥相關(guān)蛋白9抗體米曲霉平展變種節(jié)瘤擬桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
基質(zhì)金屬蛋白mei-2抗體蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種絲狀網(wǎng)尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
基質(zhì)金屬蛋白mei2抗體福氏志賀氏菌鴨腺病探針法熒光定量PCR試劑盒
有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體砂和酸速測(cè)包溶組織內(nèi)阿米巴探針法熒光定量PCR試劑盒
有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體蜂房哈夫尼菌馬腺病探針法熒光定量PCR試劑盒
β2微球蛋白抗體豌豆根瘤菌*絮狀表皮癬菌探針法熒光定量PCR試劑盒
磷酸化神經(jīng)上皮酪an酸激酶/癌激酶10抗體假單胞菌屬比氏腸微孢蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
E3連接酶MMS21蛋白抗體屎腸球菌貓杯狀病前病探針法熒光定量PCR試劑盒
環(huán)指蛋白60抗體蘇云金芽孢桿菌鴨肝炎病通用探針法熒光定量PCR試劑盒
肌球蛋白輕鏈7抗體赭裸傘長鼻分咽線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白抗體豇豆慢生根瘤菌施氏油脂線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
肌球蛋白重鏈9抗體產(chǎn)氨短桿菌馬鼻炎病探針法熒光定量PCR試劑盒
髓系/淋巴或混合型白血病11抗體球形節(jié)桿菌羊闊盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
干擾su誘導(dǎo)GTP結(jié)合蛋白MX2抗體瓜類鞘氨單胞菌丹絲菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
海藻糖合成酶(TS)測(cè)試盒微量法ras同源物基因家族成員a(RHOA)試劑盒Anti-RELA Antibody小鼠抗大鼠IgG
TU3A蛋白(TU3A)試劑盒Anti-RELB Antibody抗大鼠IgG
甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)試劑盒 Anti-REN/Renin Antibody小鼠抗IgG
肝配蛋白A受體1 (EPHA1)試劑盒Anti-RETN Antibody抗小鼠IgG
心肌營養(yǎng)su1(CT-1)試劑盒 Anti-REPRIMO(RPRM) Antibody抗猴IgG
抗糖蛋白(GP)試劑盒 Anti-RET Antibody抗大鼠IgM
中性粒性磷酸酶(NAP)試劑盒Anti-RFC1 Antibody小鼠抗IgM
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后