單克隆抗體:
1.概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點(diǎn):化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
銜接蛋白β抗體 | AP2 beta | BJ-K6725 |
?
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動(dòng)物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
?
多克隆抗體定制:
當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動(dòng)物所產(chǎn)生的抗血清實(shí)際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識(shí)別多個(gè)表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補(bǔ)體,結(jié)合并增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護(hù)胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強(qiáng)的激活補(bǔ)體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識(shí)別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
TLR11 Toll樣受體11酰基輔酶A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白64-(4-嗎啉代)胺Mouse GAPDH (Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) 檢測試劑盒
Thrombomodulin 血栓調(diào)節(jié)蛋白氨基?;?4-(4-嗎啉代)胺Mouse DNM1 (Dynamin 1) 檢測試劑盒
GDNF Receptor alpha 2 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體alpha 2脂肪甘油三酯脂酶4-(4-嗎啉代)胺Mouse DMD (Dystrophin) 檢測試劑盒
Tenascin C (C terminal) 細(xì)胞粘合素(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α12,2,4-*基-1,3-戊二單異丁酸酯Mouse SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) 檢測試劑盒
Tenascin C/-C 細(xì)胞粘合素(固生蛋白)雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子)2,2,4-*基-1,3-戊二單異丁酸酯Mouse EGR1 (Early Growth Response Protein 1) 檢測試劑盒
F-alpha 腫瘤壞死因子-α單克隆磷酸化水通道蛋白2庚酰氯Mouse EGR2 (Early Growth Response Protein 2) 檢測試劑盒
F-alpha 腫瘤壞死因子-α粘附相關(guān)激酶庚酰氯Mouse EGR3 (Early Growth Response Protein 3) 檢測試劑盒
F-alpha 腫瘤壞死因子-α磷酸化粘附相關(guān)激酶(全氟己基)乙烯Mouse EGR4 (Early Growth Response Protein 4) 檢測試劑盒
顆粒溶素Monkey EAR2 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 2) 檢測試劑盒
腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白(鋅指蛋白5)Monkey ABCG2 (ATP Binding Cassette Transporter G2) 檢測試劑盒
生長調(diào)節(jié)致癌基因gamma(GROγ)Monkey UBAP2 (Ubiquitin Associated Protein 2) 檢測試劑盒
G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白2Monkey IL-23 (Ierleukin 23) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白Monkey RXFP1 (Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) 檢測試劑盒
調(diào)節(jié)蛋白GAL4Monkey REN (Renin) 檢測試劑盒
配子生成素結(jié)合蛋白1Monkey PLP1 (Proteolipid Protein 1, Myelin) 檢測試劑盒
鋅指蛋白403/喉癌相關(guān)蛋白1Monkey CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) 檢測試劑盒
銜接蛋白β抗體Penicillium│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no活性物質(zhì),人白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制活性培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 26C-80℃冰箱凍結(jié);礦物油法;定期移植法
Corynebacterium glutamicum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no生產(chǎn)谷氨酸。培養(yǎng)基: 谷氨酸培養(yǎng)基:蛋白胨10.0g,10.0g,5.0g,葡萄糖1.0g,瓊脂20g,蒸餾水1L,pH6.8-7.0,121℃,15min。生長條件: 30℃,好氧真空冷凍干燥法
Bacillus│aquatilis分離基物: 油田水樣提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no微生物采油培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no致病芯片研發(fā)培養(yǎng)基: 51生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法
Bacillus│thuringiensis分離基物: 草魚腸胃道提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no飼料用植酸酶等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Streptomyces│fradiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)生Neomycin新霉素培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C真空冷凍干燥
Micromonospora│chalcea提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no代謝產(chǎn)物具有抗活性。培養(yǎng)基: 0027生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
Ferroplasma│thermophilium分離基物: 礦坑水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no硫化礦微生物浸出培養(yǎng)基: 815生長條件: 45℃真空冷凍干燥法
Mucor│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法