抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體 | ARHGEF18 | BJ-K6329 |
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單抗的制備過(guò)程:
1.動(dòng)物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點(diǎn):化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
組蛋白H3(PhosphoThr11)多克隆抗體100 ug Histone H3 (Phospho Thr11) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(PhosphoSer28)多克隆抗體100 ug Histone H3 (Phospho Ser28) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(phosphoSer28)多克隆抗體100 ug Histone H3 (phospho Ser28) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(PhosphoSer10)多克隆抗體100 ug Histone H3 (Phospho Ser10) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(phosphoSer10)多克隆抗體100 ug Histone H3 (phospho Ser10) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(Mono-Methyl-Lys80)多克隆抗體100 ug Histone H3 (Mono-Methyl-Lys80) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(Mono-Methyl-Lys5)多克隆抗體100 ug Histone H3 (Mono-Methyl-Lys5) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(Mono-Methyl-Lys37)多克隆抗體100 ul Histone H3 (Mono-Methyl-Lys37) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(Mono-Methyl-Lys10)多克隆抗體100 ul Histone H3 (Mono-Methyl-Lys10) Polyclonal Antibody
組蛋白H3(MonoMethylLys9)單克隆抗體(1E8)100 ul Histone H3 (Mono Methyl Lys9) Monoclonal Antibody(1E8)
組蛋白H3(MonoMethylLys79)單克隆抗體(5G5)100 ul Histone H3 (Mono Methyl Lys79) Monoclonal Antibody(5G5)
組蛋白H3(MonoMethylLys79)單克隆抗體(4C9)20 ul Histone H3 (Mono Methyl Lys79) Monoclonal Antibody(4C9)
組蛋白H3(MonoMethylLys79)單克隆抗體(1E10)100 ul Histone H3 (Mono Methyl Lys79) Monoclonal Antibody(1E10)
組蛋白H3(MonoMethylLys79)單克隆抗體(1C2)100 ul Histone H3 (Mono Methyl Lys79) Monoclonal Antibody(1C2)
組蛋白H3(Di-Methyl-Lys5)多克隆抗體100 ul Histone H3 (Di-Methyl-Lys5) Polyclonal Antibody
G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體枯草芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..變色栓菌
牛邊緣無(wú)漿體(獨(dú)山株)Salmonla enterica subsp.enterica (e ..乳酸發(fā)酵短桿菌
麥芽糖假絲酵母Cochliobolus heterostrophus Drechsler, e ..藤黃節(jié)桿菌
首爾鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..費(fèi)氏酸桿菌謝氏亞種
異常漢遜酵母freeze-dried大腸埃希氏桿菌
空泡極單胞菌Chytriomyces hyalinus Karling emend. Bostick螢光假單胞菌
都柏林沙門氏菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..潮濕纖維單孢菌
畢赤酵母屬Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..膠質(zhì)芽胞桿菌
多克隆抗體定制:
當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動(dòng)物所產(chǎn)生的抗血清實(shí)際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識(shí)別多個(gè)表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補(bǔ)體,結(jié)合并增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過(guò)胎盤,保護(hù)胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強(qiáng)的激活補(bǔ)體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識(shí)別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過(guò)敏性體質(zhì)的人血清中可檢測(cè)到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲(chóng)感染。