中文名稱 嗜酸性粒細胞陽離子蛋白抗體
英文名稱 Anti-ECP
濃 度： 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 通道蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 14kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse ECP C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
（石蠟切片需做抗原修復(fù)）
別 名 eosinophil cationic protein; EAR, Ear11, Ear4, EAR5, ECP, LOC192264, MGC143624, mR3, mR5, R1, R14, R15, R17, R5, R7, Ribonuclease 3, Rnase17, Rnase2, RNASE3, RNS3; ECP1_MOUSE.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
貨號 | YSRIBIO-018397 |
抗體的熒光標記法：
（一）基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
（二）儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體；
2.碳suan氫鈉緩沖液；
3.疊氮鈉；
4.庵氰酸熒光素；
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù)：
（一）原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
（二）準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；
2.儀器
凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。
（三）操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
2-(硅基)乙 98%C-反應(yīng)蛋白檢測試劑盒
三(硅基)硅烷 90%C肽檢測試劑盒
3-(基硅烷基)炔基溴 97%Delta-like ligand4檢測試劑盒
1-(基硅基)炔 98%Dickkopf 1檢測試劑盒
2-(基硅基)噻唑 96%DNA甲基轉(zhuǎn)移1檢測試劑盒
基硅烷磺鹽 97%DNA甲基轉(zhuǎn)移3A檢測試劑盒
氨甲基基硅烷 98%DNA甲基轉(zhuǎn)移3B檢測試劑盒
1-硅基-1-戊炔 98%D二聚體檢測試劑盒
3-(基硅基)炔 98%D-乳檢測試劑盒
1-基硅烷-1-己炔 98%D-乳脫氫檢測試劑盒
O-(基硅)羥 96%E選擇檢測試劑盒
反式-3-(基硅基)烯 97%FMS樣酪氨激3配體檢測試劑盒
3-基硅氧基-1-炔 97%GATA結(jié)合蛋白3檢測試劑盒
基硅乙酯 98%G蛋白偶聯(lián)受體120檢測試劑盒
2-硅基吡啶 97%G蛋白偶聯(lián)受體40檢測試劑盒
Anti-ECP抗體Anti-CXorf36/FITC 熒光標記脫羧蛋白體36抗體IgG
Anti-CXorf36/FITC 熒光標記脫羧蛋白體36抗體IgG
Anti-Cyclin A/FITC 熒光標記周期A抗體IgG
Anti-Cyclin B1/FITC 熒光標記周期B1抗體IgG
Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化周期B1抗體IgG
Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷
