中文名稱 LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
英文名稱 Anti-Limd1
濃 度: 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight:
72kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Limd1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 AW822033; D9Ertd192e; LIM domain-containing protein 1; LIM domains containing 1; LIMD1; LIMD1_HUMAN; OTTHUMP00000164657; OTTHUMP00000210317; rCG_25194.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.2ml/200μg |
貨號(hào) | YSRIBIO-016532 |
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
CREB(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克PALCAM Listeria selective agar( base) acc.to van Netten et al.PALCAM多粘菌素E硫酸鹽
DAP Kinase(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克李斯特氏菌瓊脂(礎(chǔ))β-谷甾醇
Histone H3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克PALCAM Listeria selective-Supplement acc.to van Netten et al PALCAM人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒,
NF kappa B p65(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克李斯特氏菌選擇添加劑人酸性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒,
NF kappa B p50(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克L-PALCAM-Listeria selective enrichment broth( base) acc.van Netten et al. L-PALCAM 李斯特氏菌選擇富集肉湯(礎(chǔ))人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒,PEDF ELISA kit
Rho(-A.-B.-C)(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Peptone water( buffered) 緩沖蛋白胨水人粒特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒, GS-ANA ELISA kit
TRAIL(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Phenol-re broth( base) 酚紅肉湯(六亞)人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒, BB-Ab ELISA kit
EGFR(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Plate count agar Casein-peptone dextrose yeast extract agar人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA試劑盒,BPI-Ab ELISA KIT
IGF-I(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克平板計(jì)數(shù)瓊脂/酪蛋白右旋糖酵母瓊脂人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒,S100A9 ELISA K
IGF-II(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Plate count skim milk agar平板計(jì)數(shù)脫脂乳瓊脂人脊髓灰質(zhì)炎病IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒,PV-IgG ELISA
PDGFR-alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Potato glucose agar 馬鈴薯葡萄糖瓊脂人促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒,GHRH ELISA
PDGFR-beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Presence-Absence Broth 存在-缺乏肉湯人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒,LCN2 ELISA
Androgen Receptor(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Pseudomonas agar F base 假單胞菌瓊脂F(xiàn)礎(chǔ)人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒,GKRP ELISA
Estrogen Receptor beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Pseudomonas agar P base 假單胞菌瓊脂P礎(chǔ)人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒,UGCG ELISA
Insulin(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克Pseudomonas CFC Supplement人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒,
Anti-Limd1抗體伊潘立酮角蛋白1抗體梓
伊潘立酮巨病PP65/CMV低質(zhì)磷脂蛋白抗體梓酚
伊潘立酮周期素C抗體紫草呋喃A
伊潘立酮(標(biāo)準(zhǔn)品)周期素B1抗體紫草苷
亞培南球蛋白抗體紫草素
亞培南周期素D1抗體紫草酸
亞培南周期素D2抗體紫丁香酚苷(五加苷B)
亞培南周期素E抗體紫花前胡苷